[发明专利]一种人类DNA STR检测用标准物质的制备方法有效
申请号: | 201110185834.0 | 申请日: | 2011-07-01 |
公开(公告)号: | CN102251032A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 毕万里;何召明;叶健;赵兴春 | 申请(专利权)人: | 公安部物证鉴定中心;苏州新海生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/66;C12R1/19 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 冯琼;李玉秋 |
地址: | 100038 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人类 dna str 检测 标准 物质 制备 方法 | ||
1.一种制备人类DNA STR检测用标准物质的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、以人类基因组作为模板,人工合成或PCR扩增获得含有人类DNA短串联重复序列基因座的目的基因片段;
步骤2、将步骤1的目的基因片段与质粒载体重组,重组质粒转入到细胞中,筛选出含有目的基因片段的阳性克隆并进行测序鉴定;
步骤3、提取步骤2鉴定的阳性克隆中的重组质粒,将含有不同基因型的重组质粒等比例混合,配置成人类基因组的DNA STR检测用标准物质。
2.根据权利要求1所述的方法,所述目的基因片段为5~200种,每种目的基因片段含有至少一个基因型。
3.根据权利要求1所述的方法,所述目的基因片段为10~50种,每种目的基因片段含有至少一个基因型。
4.根据权利要求1中所述的方法,所述目的基因片段分别含有STR基因座CSFlPO、D2S1338、D3S1358、D5S818、D6S1043、D7S820、D8S1179、D12S391、D13S317、D16S539、D18S51、D19S433、D21S11、FGA、Penta D、Penta E、Th01、Tpox、vWA和性别标记位点Amelogenin的片段,用SEQ ID No.1-SEQ ID No.42所示引物序列分别进行PCR扩增。
5.根据权利要求1所述的方法,步骤2所述细胞是大肠杆菌细胞,所述质粒载体为大肠杆菌相应的质粒。
6.根据权利要求1所述的方法,步骤3所述重组质粒为线性质粒。
7.含有权利要求1制备的DNA STR标准物质的试剂盒。
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