[发明专利]抗人肾损伤分子1的体外诊断试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种抗人肾损伤分子1的体外诊断试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含：

已包被单克隆第一抗体的96孔板；

生物素标记的单克隆第二抗体；

人肾损伤分子1的标准品；

标记有辣根过氧化物酶的亲和素；

底物；

洗涤液；

封闭液；

终止液；

所述的单克隆第一抗体，特异识别人肾损伤分子1的蛋白N端，其亲和力常数为5.3*10^-9；

所述的生物素标记的单克隆第二抗体含有生物素标记，特异识别人肾损伤分子1的蛋白C端，其亲和力常数为1*10^-9。

2.如权利要求1所述的抗人肾损伤分子1的体外诊断试剂盒，其特征在于，所述的已包被单克隆第一抗体的96孔板是通过人肾损伤分子1的单克隆第一抗体包被96孔酶标板制成。

3.一种采用权利要求1所述的试剂盒体外检测抗人肾损伤分子1的检测方法，其特征在于，该方法包含以下步骤：

步骤1，建立检测标准曲线：以人肾损伤分子1的标准品的浓度为纵坐标，光密度值为横坐标，在对数坐标纸上绘出标准曲线；

步骤2，向已包被单克隆第一抗体的96孔板中加入洗涤液洗涤，然后，加入封闭液室温孵育1小时；

步骤3，加入洗涤液洗涤，然后加入待测样品，室温孵育2小时；

步骤4，加入洗涤液洗涤，然后加入所述的生物素标记的单克隆第二抗体，室温孵育2小时；

步骤5，加入洗涤液洗涤，然后加入标记有辣根过氧化物酶的亲和素，室温避光孵育20分钟；

步骤6，加入洗涤液洗涤，然后加入底物溶液，室温避光孵育20分钟，显色；

步骤7，加入反应终止液；

步骤8，通过酶标仪读取光密度值，根据步骤1所绘的标准曲线算出人肾损伤分子1含量。

4.如权利要求3所述的诊断抗人肾损伤分子1的检测方法，其特征在于，步骤3所述的待测样品包含培养细胞上清、细胞和组织裂解液、人血清和人尿液。