[发明专利]铁皮石斛种苗简易化工厂生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种铁皮石斛种苗简易化工厂生产方法。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)又称黑节草，是一种附生、多年生草本兰科植物。主要分布在我国云南、贵州、广西、台湾等地。年平均气温12-18度，相对湿度60-75％，林间透光度60％左右，年降雨量1100-1500mm。生长在常绿阔叶林中，附生于树干上或石灰岩上。野生铁皮石斛种子成活率极低，生长缓慢，从种子萌发到进入商品阶段需5-7年才能采收，造成其产量很少。近年，由于市埸供不应求，人们过度采挖，再加上环境恶化，铁皮石斛自然资源已日趋枯竭。于是应用组织培养技术来生产铁皮石斛，成为新热点。铁皮石斛，加工后俗称铁皮枫斗，为传统名贵中药材，具有增强免疫力、抗肿瘤、滋阴养胃，清热生津、润肺止咳之功效。近代药理药化研究表明，铁皮石斛药物化学成分主要是多糖类、生物碱和抗肿瘤活性物质。多糖含量达18.2％-22.27％，这些多糖类是免疫增强剂，具有增强T细胞及巨噬细胞免疫活性作用。铁皮石斛还含有两种抗癌菲类化合物，具有对肝癌和艾氏腹水癌细胞的抑制作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种铁皮石斛种苗简易化工厂生产方法，可以克服一般组织培养的困难，特别是为一般农村塑料大棚，设施农业生产增加一种新品种。它是采用铁皮石斛种子非共生萌发培养，在种子类原球茎(PLBs)诱导分化后，将成苗分化的原球茎从培养瓶中转移到PP塑料袋中，塑料袋封口后，悬挂在温室大棚内，靠自然加温和光照，不旦减少了碳排放，而且不会二次感染(塑料袋是封口的)。塑料袋悬挂在温室内，充分利用了有效空间，实现了铁皮石斛种苗批量化生产，每亩温室大棚可生产铁皮石斛种苗在百万级以上。

本发明提供的一种铁皮石斛种苗简易化工厂生产方法包括以下步骤：

按常规方法进行铁皮石斛杂交授粉；对铁皮石斛种子进行非共生萌发培养；种子类原球茎(PLBs)在1/2MS培养基上进行诱导分化；将分化的类原球茎接种在PP塑料袋内，进行成苗分化培养；培养3-4个月后即可进行成苗移栽。

本发明提供的一种铁皮石斛种苗简易化工厂生产方法包括以下步骤：

1)在铁皮石斛开花(每年3-4月份)按常规方法进行人工杂交授粉(自花或同株异花)，授粉后的铁皮石斛要加强管理，注意通风，半透光，保持30-50％的湿度，温度控制在15-35℃，防止落花落果。

2)铁皮石斛种子非共生萌发培养，取授粉后6-8个月的铁皮石斛蒴果，在超净工作台内用75％酒精消毒1分钟，再用0.1％升汞消毒10分钟，无菌水冲洗5遍，用无菌解剖刀沿蒴果纵轴方向将蒴果切开，将种子接种在1/2MS液体培养基中，25℃条件下间歇振荡培养，进行种子非共生萌发培养。

3)铁皮石斛种子进行非共生萌发培养30天后，将萌发的铁皮石斛种子转入1/2MS固体培养基上，在光周期14小时/天，光强度3000Lux，室温25℃条件下继续培养，进行原球茎诱导与分化培养。

4)当铁皮石斛种子类原球茎(PLBs)分化后，在超净工作台内转接至PP塑料袋内，用封口机将袋口封死，严防漏气。每袋装入20-25毫升1/2MS固定培养基，接种10-15棵幼苗，将接种好的塑料袋悬挂在温室内，在光周期14小时/天，光照强度3000Lux，室温25℃条件下，继续培养，至铁皮石斛成苗形成。

5)成苗移栽，待铁皮石斛种苗在塑料袋内生长3-4个月，生长出4-6片叶，新根旺盛时，即可将塑料袋剪开，用清水轻轻地洗净培养基，将苗略吹干后，移栽在重量比为1∶1∶1的兰花土、火烧土和椰糠基质上，放在阴凉、通风处，按常规铁皮石斛栽培条件，进行精心管理，特别要注意病虫害的防御。

本发明提供了一种铁皮石斛种苗简易化工厂生产方法可以克服一般组织培养的困难，特别是为一般农村塑料大棚，设施农业生产增加一种新品种。它是将铁皮石斛成苗分化的原球茎从培养瓶中转移到PP塑料袋中，塑料袋封口后，悬挂在温室大棚内，靠自然加温和光照，不旦减少了碳排放，而且不会二次感染(塑料袋是封口的)。塑料袋悬挂在温室内，充分利用了有效空间，实现了铁皮石斛种苗批量化生产，每亩温室大棚可生产铁皮石斛种苗在百万级以上，具有十分可观的经济效益和社会效益。

附图说明

图1：铁皮石斛花。

图2：铁皮石斛蒴果。

图3：铁皮石斛种子非共生萌发培养。

图4：铁皮石斛种子原球茎诱导。

图5：成苗分化培养。

图6：塑料袋悬挂式种苗培养。