[发明专利]一种单细胞分子生物学鉴定法

权利要求书

1.一种单细胞分子生物学鉴定法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）采集样品，将样品保存在适当的缓冲液中；所述样品可以为血液、骨髓液、组织块，生物活检，细胞系细胞；

（2）用有识别细胞的抗体结合的磁珠分离富集单个细胞；

（3）将分离富集到的单个细胞收集在含有RNA Inhibitor的试管内；

（4）将收集起来的单细胞用细胞裂解缓冲液来裂解单细胞，直接合成单个细胞的cDNA，同时全面扩增该单细胞的cDNA；

（5）用定量PCR来检测单个细胞相关的多种基因的表达水平包括癌细胞相关的基因，组织特异性基因，根据表达信号的特点，确定单个细胞的属性和组织特异性。

2.根据权利要求1所述的单细胞分子生物学鉴定法，其特征在于，所述步骤（3）后，如果不需要马上对单个细胞进行cDNA合成和扩增，则可将样品放在-20℃～-80℃的环境下保存到使用。

3.根据权利要求1所述的单细胞分子生物学鉴定法，其特征在于，所述步骤（1）中样品为血液和骨髓液时，需要用EDTA或含有固定液的采血管来收集带血液的样品。

4.根据权利要求1所述的单细胞分子生物学鉴定法，其特征在于，所述步骤（4）中合成cDNA，同时全面扩增cDNA的引物结构为DNA和RNA的混合引物。

5.根据权利要求1所述的单细胞分子生物学鉴定法，其特征在于，所述步骤（5）中定量PCR为qRT-PCR。

6.根据权利要求1至5任意一项所述的单细胞分子生物学鉴定法，其特征在于，所述单个细胞包括不同的单个癌细胞和血液白细胞。