[发明专利]肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种抗原细胞毒性T细胞（CTL）表位，特别涉及肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位，还涉及该CTL表位的应用。

背景技术

神经胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发肿瘤，发生率约占颅内肿瘤的30%~50%，且绝大多数为恶性肿瘤，采用传统肿瘤治疗方案如手术、化疗、放疗等，患者的平均生存期往往不足1年。因此，寻求新的治疗方法迫在眉睫。

肿瘤特异性免疫治疗由于不伤及无关正常组织，是近年来发展迅速的肿瘤治疗方法。其基本原理是肿瘤抗原多肽在抗原提呈细胞（APC）的作用下以MHC-I-肽复合物（与MHC-I类分子结合的肽被定义为CTL表位）的形式被提呈于APC表面，CTL通过其T细胞受体特异识别APC表面的MHC-I-肽复合物而得以活化，最终特异识别存在于肿瘤细胞表面的抗原多肽而特异杀伤肿瘤细胞。因此，寻求特异肿瘤抗原及其相应的CTL表位是肿瘤特异性免疫治疗的关键。

Pokemon是近年发现的转录抑制因子，由Zbtb7基因编码，是POK蛋白家族的成员之一，在细胞分化中发挥重要作用。研究发现，Pokemon是肿瘤发生的一个关键因素。缺失Zbtb7基因的小鼠胚胎成纤维细胞对其它原癌基因如E1A、Ras、Myc和T2Ag等介导的细胞转化完全无反应。在转基因小鼠模型中，Pokemon的过表达导致了肿瘤的发生，其通过直接结合特异地抑制肿瘤抑制基因ARF的转录，BCL6基因的活性也有赖于Pokemon。在神经胶质瘤、乳腺癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌和膀胱癌等人类肿瘤中，Pokemon异常高表达，也证明了人类许多肿瘤的发生是由于Pokemon表达异常升高所引起的。关于Pokemon的作用模式研究结果显示，Pokemon的作用位于许多肿瘤抑制基因和原癌基因的上游，因此，将其作为靶基因将有助于肿瘤的根治。

由于HLA-A*0201是中国人群最为常见的HLA-I类分子的型别，阳性率高达50%，同时也是北美高加索人种最常见的HLA-I类分子的型别，阳性率高达98%。因此，鉴定出肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位，将会对中国人群和北美高加索人群中Pokemon表达异常升高的恶性肿瘤提供免疫治疗的基础。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位，该表位能够以高亲和力结合HLA-A*0201，所形成的复合物稳定，能够诱导肽特异性的CTL应答，刺激肽特异性CTL分泌高水平的IFN-γ并对肿瘤细胞产生特异性杀伤效应。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位，其氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示。

本发明的目的之二在于提供所述肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位在制药方面的应用。

为达到此目的，本发明提供如下技术方案：肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位在制备肿瘤治疗性肽疫苗中的应用。

进一步，所述肿瘤治疗性肽疫苗为神经胶质瘤治疗性肽疫苗。

本发明的有益效果在于：本发明提供了肿瘤抗原Pokemon的HLA-A*0201限制性CTL表位，该CTL表位能够以高亲和力结合HLA-A*0201，所形成的复合物稳定，能够诱导肽特异性的CTL应答，刺激肽特异性CTL分泌高水平的IFN-γ并对肿瘤细胞产生特异性杀伤效应，可用于制备肿瘤治疗性肽疫苗例如神经胶质瘤治疗性肽疫苗，在肿瘤特异性免疫治疗领域有着潜在、良好的开发应用前景。

附图说明

图1为预测CTL表位P1与HLA-A*0201的复合物模型。

图2为预测CTL表位P2与HLA-A*0201的复合物模型。

图3为预测CTL表位P3与HLA-A*0201的复合物模型。

图4为预测CTL表位P4与HLA-A*0201的复合物模型。

图5为预测CTL表位P1的分子动力学模拟构象。

图6为预测CTL表位P2的分子动力学模拟构象。

图7为预测CTL表位P3的分子动力学模拟构象。

图8为预测CTL表位P4的分子动力学模拟构象。

图9为预测CTL表位肽P1、P2、P3、P4与HLA-A*0201的亲和力检测结果。