[发明专利]用废糖蜜和废甘油发酵生产槐糖酯的方法

权利要求书

1.一种用废糖蜜和废甘油发酵生产槐糖酯的方法，其特征在于实施步骤如下：

（1）孢子悬液的制备：将球拟酵母菌TJZKBA10326接种到培养基斜面上，于30℃恒温培养2-4天，加入质量浓度为0.75%的生理盐水洗涤菌丝体，获得菌悬液，悬液中孢子含量约为10⁵-10⁶个，待用；斜面培养基组成包括，单位1L：葡萄糖8g，麦芽粉3g，蛋白胨4g，酵母粉4g, 琼脂15g，用蒸馏水定容至1L，pH值3.5；其中所用菌种：球拟酵母菌TJZKBA10326；

（2）上述菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中，液体种子培养基组成包括，单位1L：葡萄糖含量20-60g，玉米油含量20-60g,酵母粉4-8g,尿素0.5-1g, 用蒸馏水定容至1L，pH值3.5；将液体种子培养基于121℃、15min灭菌再冷却；然后按照体积百分比2-5%的接种量将孢子悬液接入上述冷却的液体种子培养基中，500ml规格的摇瓶装液量是100ml，摇瓶于30-34℃、转速为100-150rpm的摇床上培养24h，得到液体种子；

（3）上述液体种子培养基用于接种至灭菌后的5L发酵罐中，发酵罐培养基组成包括：废甘油240-360g, 废糖蜜稀释1-5倍, 用蒸馏水定容至3L，pH值4.0-4.5，将发酵罐培养基于121℃、15min灭菌再冷却；然后按照体积比2-5%的接种量将液体培养基接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度30-34℃，溶氧控制在30-40%，发酵时间48-72h；

（4）发酵结束后，用与发酵液等体积的有机溶剂乙酸乙脂/异丙醇，所述乙酸乙脂/异丙醇两者比例4：1，单位v/v，混合有机溶剂提取槐糖脂，并在70℃抽真空除去有机溶剂，得到槐糖脂产量为40-80g/L。