[发明专利]microRNA-26在制备预防和治疗房颤药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种核酸类物质在制备治疗疾病药物中的应用，特别涉及microRNA-26在制备治疗房颤药物中的应用，本发明属于生物医药领域。

背景技术

房颤(AF)是最常见的心律失常之一，其危害严重，可引起血管栓塞，增加患者的死亡率。房颤与心力衰竭密切相关，它可引起心衰，还可加重心衰患者的左室功能异常。心衰患者中房颤发病率高达10-50％。房颤发病率随着年龄增长明显上升，在55岁以下人群，AF发病率为0.1％，而80岁以上人群则高达9％。目前，房颤的防治效果并不理想，传统药物治疗常导致更严重的心律失常发生，射频消融术复发的几率较高。因此，急需研发新的房颤治疗药物，改善目前的治疗现状。microRNA(小RNA、miRNA)是一类对基因表达起调控作用的约22个核苷酸长的内源性非编码小核苷酸，成熟miRNAs通过与mRNA的3’非翻译区部分互补结合进而抑制其蛋白质翻译。miRNAs占人类基因组的3％，大约参与调控30％蛋白质编码基因的表达。研究表明，miRNAs广泛参与了不同生理以及病理过程的调节，如发育、凋亡、分化、增殖、代谢、应激等。近几年，miRNAs在心血管系统中的调控作用不断得到阐明，已成为心血管疾病的研究热点。miRNAs是调控心律失常、心力衰竭、心肌肥厚以及动脉粥样硬化等心血管疾病的关键调控分子。基于microRNA靶点的药物在心血管疾病中的应用不断获得实验成功，从而心血管疾病的防治带来新的希望，因此发现不同病理生理情况下起关键调节作用的microRNA亚型变化，并阐明其功能，将会对该疾病的治疗带来新的靶标和产生新的干预策略。尽管越来越多的microRNAs作为心血管疾病的决定因素和治疗靶点被发现，但在心房颤动中的关键microRNA亚型仍没有确定，其所发挥的功能仍是对该领域科研人员的挑战。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明采用多种技术手段证明了microRNA-26(miR-26)在心房颤动中的改变及其对房颤的治疗作用，最终确定microRNA-26可以作为制备治疗心房颤动的防治药物。

本发明的microRNA-26在制备治疗房颤药物中的应用，所述的microRNA-26序列如下所示：

miR-26a：5’-UUCAAGUAAUCCAGGAUAGGCU-3’；及/或

miR-26b：5’-UUCAAGUAAUUCAGGAUAGGU-3’。

本发明的microRNA-26在制备预防房颤药物中的应用，所述的microRNA-26序列如下所示：

miR-26a 5’-UUCAAGUAAUCCAGGAUAGGCU-3’；及/或

miR-26b 5’-UUCAAGUAAUUCAGGAUAGGU-3’。

本发明的microRNA-26在制备预防和治疗房颤药物中的应用，制备的药物可以只含microRNA-26，也可通过制成一种药物组合物的方式实现，其特征在于包含以上所述的有效剂量的microRNA-26及药学上可接受的载体；

其中，所述的载体为病毒、胆固醇，纳米颗粒，壳聚糖，脂质体等，合成miR-26并与上述的适当载体连接形成药物，可制成注射制剂等，通过静脉或肌肉注射的方式，用于治疗心房颤动。

例如将microRNA-26与胆固醇连接制备相应的药物，其制备方法可采用首先化学合成microRNA-26序列，在其尾端连接胆固醇的常规核酸制剂的方法；

例如将microRNA-26与纳米颗粒连接制备相应的药物，其制备方法可采用：化学合成microRNA-26序列，将其与适宜的纳米颗粒混合，制成连有microRNA-26纳米颗粒，用于房颤药物的制备中。

为了增加核酸试剂的使用效果，还可辅以专用的稳定剂和特异性免疫增强剂精制而成。

附图说明

图1为pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体图谱；

图2为pDONR221载体图谱；

图3为pAD/CMV/V5-DEST载体图谱；

图4为腺病毒载体构建的检测；图4A为穿梭质粒与骨架质粒共转染后GFP的表达；4B为病毒液接种HEK-293细胞后GFP的表达；

图5为利用心电监测仪检测注射腺病毒miR-26后小鼠房颤的发生率(A)与持续时间(B)；

图6为利用realtime PCR检测在体注射腺病毒表达载体后小鼠心房肌miR-26的表达水平。