[发明专利]菊黄东方鲀与红鳍东方魨三倍体的诱导

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼类的制种方法，特别是涉及一种菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的生产方法，该技术属于海洋生物技术领域。

背景技术

菊黄东方鲀俗称艇巴、满天星等，主要分布于中国黄海、东海和渤海。而红鳍东方鲀主要分布于北太平洋西部的日本、朝鲜半岛和中国沿海。红鳍东方鲀是个体最大、经济价值较高的品种之一。因其肉质细嫩、味道鲜美、蛋白质高、营养丰富，素有“鱼类之王”的美誉，深受广大美食家的喜爱。

红鳍东方鲀生长快，但是毒性大，国内不允许食用；菊黄东方鲀生长慢，在江苏、上海地区有食用习惯，商品价值高，市场也很大。因此，想利用前者的生长优势，通过杂交，获得与菊黄鲀形态特征相似，但是生长快的杂交鲀，以提高商品价值。

从国内外水产动物研究的趋势来看，三倍体技术是具有潜力的一种方法。三倍体水产动物由于具有不育性的特点，即性腺不能发育成熟或发育畸形，而不能繁殖后代，因此没有性成熟或繁殖方面的能量损耗，避免了繁殖阶段的生长停止或高死亡率。目前，三倍体水产动物在控制过度繁殖、加快生长速度等方面都显示了良好的效果。

因此根据菊黄东方鲀的特性，开发一种诱导方法，获得菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体，以提高菊黄东方鲀的生长速度，提高其经济效益和社会效益是养殖业者的共同期盼。

发明内容

本发明旨在提供一种菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的诱导方法。

本发明的步骤为：

1)选取性腺成熟的红鳍东方鲀雄鱼和雌鱼、菊黄东方鲀的雄鱼和雌鱼，分别采集精液和成熟卵子；进行正反杂交；

2)将精液与卵粒均匀混合，室温静置2min，加入海水进行人工受精；

3)三倍体获得：将受精后3-7min的受精卵转移至30-40℃海水浴中进行热休克5-20min，抑制第二极体的形成及其排出，使染色体组加倍。

4)解除休克将卵移至常温海水中孵化，按照普通菊黄东方鲀苗种生产方法管理，培育菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体鱼苗。

在步骤2)中，海水水温为15-20℃。

在步骤3)中，海水中起始热休克的时间为受精后3-7min；热休克持续时间为10-16min；

热休克温度为30-36℃。

在步骤4)中，海水孵化的温度为15-20℃。

更优选地，

步骤3)中，海水中起始热休克的时间为受精后4-6min；热休克持续时间为14-16min，

热休克温度为34-35℃；

步骤4)中，海水孵化的温度为17℃。

采用上述方法诱导，能够得到较高的诱导率。

本发明的进一步方案为：诱导得到菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体后，利用染色体核型分析、流式细胞仪等技术测定上述鱼体的染色体倍数，然后进行菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体培育。

本发明的有益效果在于：

1.本发明通过利用高温休克方法进行诱导，并通过控制诱导持续时间，抑制第二极体释放，从而大大提高菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的诱导率，据实验统计，所获得的菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体的人工两导率高达100％。

2.本发明工艺简单，成本低，可操作性强，避免了化学方法进行诱导带来的污染。

3.采用本发明所述方法培育的菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体，具有生长速度快、个体规格大、养殖成活率高，抗病能力强、毒性低等优点，具有良好的经济效益和社会效益。

在菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体诱导中，其中最优选的诱导条件为，选取性腺成熟的红鳍东方鲀雄鱼和雌鱼、菊黄东方鲀的雄鱼和雌鱼，分别采集精液和成熟卵子；进行正反杂交；受精后5min用35℃的海水浴热休克处理15min，抑制第二极体排出，然后在17℃的海水中孵化，完成热休克法的三倍体诱导。

采用该条件进行菊黄东方鲀与红鳍东方魨杂交三倍体诱导，实验结果表明，孵化率＝6.69％，三倍体率达100％，相对三倍体数为35.42％。

附图说明

图1菊黄东方鲀二倍体鱼苗细胞DNA荧光分布直方图。

图2红鳍东方鲀二倍体鱼苗细胞DNA荧光分布直方图。

图3菊黄东方鲀母本×红鳍东方鲀父本三倍体鱼苗细胞DNA荧光分布直方图。

图4菊黄东方鲀父本×红鳍东方鲀母本三倍体鱼苗细胞DNA荧光分布直方图。

具体实施方式

以下实验例和实施例将对本发明做进一步的说明。

实验例1