[发明专利]建鲤类胰岛素生长因子1启动子SNPs的PCR-RFLP检测方法有效
| 申请号： | 201110163127.1 | 申请日： | 2011-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN102311996A | 公开（公告）日： | 2012-01-11 |
| 发明（设计）人： | 唐永凯;俞菊华;徐跑;李建林;李红霞;董在杰 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 李纪昌 |
| 地址： | 214081*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 建鲤类 胰岛素 生长因子 启动子 snps pcr rflp 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.建鲤类胰岛素生长因子1启动子SNPs的PCR-RFLP检测方法，其特征在于该检测方法包括利用位于Seq NO.1 第731bp的单核苷酸多态性，PCR扩增出含有多态性位点的基因片段进行检测，其中引物为Seq NO.3和Seq NO.4。
2.根据权利要求1所述的建鲤类胰岛素生长因子1启动子SNPs的PCR-RFLP检测方法，其特征在于，PCR反应条件为：
含有50ng基因组DNA、15mmol/L Tris-HCl、pH8.0 50mmol/L KCl、2mmol/L MgCl2、200umol/L 在dNTPs、10μmol/L引物和0.5U Taq DNA聚合酶的25μl反应体系中进行、反应条件是95℃ 3min、30循环、72℃延长8min，4℃度保存，其中30循环的条件为94℃ 30s、58℃ 30s、72℃ 1min；5ul PCR产物，加入0.2ul×10U/ul的限制性内切酶，37℃酶切3小时，消化产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测。
3.根据权利要求1所述的建鲤类胰岛素生长因子1启动子SNPs的PCR-RFLP检测方法，其特征在于，其中所述的多态性是118bp和282bp限制性片段长度多态性。
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