[发明专利]使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的试剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的试剂及其制备方法。

背景技术

虽然各种治疗方法不断在进步，心血管疾病仍然是导致死亡的一个主要原因。在发达国家，缺血性心脏病导致的死亡占由心血管疾病引起的死亡的50％以上。据美国国家健康和营养调查2005-2006年的数据，1/3或近80,000,000的美国成年人患有一种或多种心血管疾病，其中大约有38,100,000人年龄在60或60岁以上。死亡资料显示2005年美国以心血管疾病(包括先天性心血管缺陷)为潜在原因引起的死亡人数为864,480，占总死亡人数2,448,017的35.3％，或者说每2.8个死亡人数中有一个是以心血管疾病为潜在原因而死的。2005年心血管疾病的总死亡人数(1,372,000)大约占了所有死亡人数的56％。大约每天有2,400美国人死于心血管疾病，即每30秒就有一个人死于心血管疾病。每年死于心血管疾病的人几乎与死于癌症、慢性下呼吸道疾病、意外和糖尿病的人一样多(NCHS)。

干细胞移植有可能修复和改善心脏状况，从而极大地帮助降低疾病的发生率和死亡率。Dib等人证实了自体成肌细胞移植的可行性、安全性和患者的成功生存，并指出干细胞移植可能是治疗末期心脏病的一个潜在的治疗方法。

同种异体骨髓间充质细胞可以从骨髓中分离出来。它们可以通过培养大量增殖同时保持其多种潜能特性。它们是组织工程使用的初级细胞，可以表达多种细胞类型，组织工程是一个非常有前途有希望的领域，它让我们可以重建器官，修复病变和受损的组织。

同种异体骨髓间充质细胞主要有两种：造血骨髓干细胞(单核)和骨髓间充质干细胞。人们用后肢缺血再灌注模型进行研究，对这两种干细胞进行了深刻的对比。间充质干细胞有更强的修复作用，因为它们分泌更多与血管生成有关的细胞因子。间充质干细胞有多向分化潜能，能逃过受体免疫系统的检查，甚至能降低T细胞的反应，这使我们可以使用多种异体干细胞进行治疗。

目前所记载的研究大部分都将干细胞注射到冠状动脉内和肌肉内。一个有698位病人的研究分析显示使用冠状动脉内注射干细胞治疗急性心肌梗塞对于恢复心脏功能和心脏变形能达到相关的临床效果。使用细胞治疗的病人其目标血管重建的需求并没有增加，研究发现治疗是安全的。虽然乍一看，冠状动脉内注射是细胞应用的一种方式，但放射标记骨髓细胞显示：与肌肉内注射相比，冠状动脉内注射所留下的细胞量较少。但肌肉内注射只能对局部区域起作用。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的试剂。

本发明所提供的使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的试剂，由使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的培养基和离体的骨髓间充质干细胞组成；所述使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的培养基，由溶质和溶剂组成，所述溶质由如下终浓度的七种物质组成：葡萄糖4.0g/L-5.0g/L，碳酸钠0.11g/L-0.19g/L，L-谷氨酰胺0.584g/L-0.702g/L，二甲基亚砜100ml/L-130ml/L，转铁蛋白50g/L-67g/L，胰岛素5g/L-6.6g/L，碱性成纤维细胞生长因子0.01g/L-0.05g/L，所述溶剂为注射用水。所述溶质具体可由如下终浓度的七种物质组成：葡萄糖4.5g/L，碳酸钠0.11g/L，L-谷氨酰胺0.584g/L，二甲基亚砜100ml/L，转铁蛋白50g/L，胰岛素5g/L，碱性成纤维细胞生长因子0.01g/L。

其中，所述转铁蛋白可为人转铁蛋白，所述胰岛素可为人胰岛素，所述碱性成纤维细胞生长因子可为人碱性成纤维细胞生长因子，所述骨髓间充质干细胞可为人骨髓间充质干细胞。

所述培养基和所述离体的骨髓间充质干细胞的配比可为每毫升培养基10⁶-10⁸个所述骨髓间充质干细胞，具体可为每毫升培养基10⁷个所述离体的骨髓间充质干细胞，如每毫升培养基(1.0×10⁷-1.5×10⁷)个所述离体的骨髓间充质干细胞。

所述离体的人骨髓间充质干细胞具体可为离体的人同种异体骨髓间充质干细胞。

所述使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的试剂，可按照包括如下步骤的方法制备：将所述离体的骨髓间充质干细胞和所述使骨髓间充质干细胞靶向于心肌梗死灶的培养基混合，得到所述的试剂。