[发明专利]一种金雀花碱的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种金雀花碱的制备方法，尤其是一种采膜分离和高速逆流色谱制备金雀花碱的方法。

背景技术：

金雀花碱，分子式C₁₁H₁₄ON₂，分子量190.24，分子结构式：

物理性质：斜方棱柱结晶(丙酮)，熔点152～153℃。易溶于水、乙醇、氯仿、苯，不溶于石油醚、乙醚。

金雀花碱异名野靛碱，具有止咳祛痰之功效，运用于抢救因手术和各种创伤引起的反射性呼吸暂停、休克和新生儿窒息等。近期研究表明，可用于生产戒烟药、急救药、止咳药。

牧马豆为双子叶植物豆科披针叶黄华的种籽，主要成分有金雀花碱、黄华碱、合模黄华碱、臭豆碱、甲基金雀花碱、鹰爪豆碱；还含羽扇豆碱、菱叶黄华碱、黄华胺.叶含少量黄酮类化合物。种子含生物碱达5％，主要成分为金雀花碱含量2％左右。

现有对金雀花碱提取纯化工艺多是传统工艺，有机试剂提取，酸化萃取，碱化萃取，氧化铝柱或硅胶柱层析，丙酮结晶等工序。如吴勇等发表的“高纯度金雀花碱的提取方法研究”和赵宝玉等发表的“牧马豆中生物碱的提取分离及鉴定”，所公开的方法即是传统工艺。专利(申请号200910023485)“一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法”，该发明也是有机试剂提取，酸化处理萃取，碱化萃取，乙醚萃取，丙酮结晶等工序。如上所述现有制备工艺，存在着操作复杂，收率低、污染严重等技术缺陷。

发明内容：

本发明要解决的技术问题克服现有工艺的技术缺陷是，提供一种金雀花碱的制备方法。该方法采膜分离和高速逆流色谱制备金雀花碱的方法，能够产品收率，减少污染，可产业化生产。

为了解决上述技术问题，本发明提取技术方案如下：一种金雀花碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

a.牧马豆种子粉碎，加0.5-1％盐酸或硫酸水溶液冷浸，提取液调节pH中性过滤，加入超滤膜超滤，再加入纳滤膜过滤，透过液用反渗透膜浓缩，得浓缩液；

b.上述浓缩液调pH9-10，用二氯甲烷萃取，萃取液浓缩再采用高速逆流色谱分离，根据紫外检测器图谱收集目标成分，低温干燥即得。

所述的超滤膜截留分子量3000-10000，纳滤膜截留分子量300-600。

所述的超滤膜、纳滤膜和反渗透膜可选管式、卷式和中空膜中的一种，材质可选聚酰胺纤维、聚醚砜、聚四氟乙烯中的一种。

所述的高速逆流色谱溶剂系统为氯仿、乙醇、磷酸二氢钠缓冲液(pH5-6)，混合比例3-5∶4-5∶2-3，上相为流动相，下相为固定相。

本发明优点是：工艺采用膜过滤，是一种低能耗的物理分离方法，对物质品质有很好的保护，有效地分离成分，样品无损失，属于环保型方法；工艺还采用高速逆流色谱，它是利用液液分配色谱原理，样品分离无损失，克服了固体层析柱的难解析、操作繁琐而且产生大量固体废物的缺陷。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

牧马豆种子粉碎，取3kg，加10倍量1％盐酸水溶液冷浸3次，提取液调节pH中性，过滤后加入截留分子量3000的中空聚酰胺纤维超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量300中空聚酰胺纤维纳滤膜过滤，透过液再加入中空聚酰胺纤维反渗透膜浓缩，浓缩液调pH10，用二氯甲烷萃取3次，萃取液浓缩至小体积。取氯仿、乙醇、磷酸二氢钠缓冲液(pH5)，按比例3∶5∶2混合，静置分层，取下相充满高速逆流色谱柱做固定相，开动主机，调整转速800rpm，泵入上相，待有液体流出，调整流速2ml/min，同时有进样阀进浓缩液，根据紫外检测器图谱收集目标成分，连续制备，流分低温干燥得金雀花碱45g，经HPLC检测，含量96.7％。

实施例2：