[发明专利]治疗咳喘病的中药组合物的检测方法

权利要求书

1.一种治疗咳喘病的中药组合物制剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

选取如下原料药：

射干20-40重量份      桔梗10-20重量份        淫羊藿30-60重量份

黄芪30-50重量份      麻黄(炙)10-20重量份    地龙10-20重量份

淮山药20-40重量份    山楂(生)60-80重量份；

该检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种：

鉴别

A.取相当于原料药10-50g该组合物制剂，研细，加甲醇40-80ml，超声处理10-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-60ml使溶解，加正丁醇振摇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加1-3ml甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取射干对照药材0.5-2g，加甲醇10-20ml，超声处理20-60分钟，滤过，滤液浓缩至1ml作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液3-10μl，对照药材溶液1-5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(6-10∶1-5∶0.5-2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

B.取相当于原料药40-70g该组合物制剂，研细，加三氯甲烷10-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，滤液浓缩至0.5-2ml，作为供试品溶液；另取地龙对照药材0.5-2g，加三氯甲烷10-40ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照药材溶液3-10μl，供试品溶液5-20μl分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(8-12∶0.5-2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

C.取相当于原料药40-70g该组合物制剂内容物，研细，加1-3％氢氧化钾甲醇溶液40-60ml，称定重量，加热回流，保持微沸0.5-2.0小时，滤过，滤液加三氯甲烷-正丁醇(1-3∶0.5-2)混合溶液提取1-3次，每次50ml，合并提取液，用正丁醇饱和的氨试液洗涤1-3次，每次30-50ml，弃去氨试液，三氯甲烷-正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5-2.0ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1-1.0mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液1-5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(10-20∶5-10∶1-5)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

D.取相当于原料药5-20g该组合物制剂内容物，研细，加30-70％乙醇30ml，加热回流10-50分钟，取出，放冷，滤过，滤液蒸至近干，加水1-5ml使溶解，加于聚酰胺柱(5g，柱径10～15mm)上，用水100ml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5-2.0ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.5-2.0mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药黄2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以无水乙醇-水(55∶44)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；

E.取相当于原料药20-40g该组合物制剂内容物，研细，加浓氨试液2-8ml使湿润，加氯仿20-60ml，加热回流0.5-2.0小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加氯仿制成每1ml含0.5-2.0mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-正丁醇-浓氨试液(10-20∶1-3∶1-5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点；

F.取相当于原料药20-50g该组合物制剂内容物，加7％硫酸乙醇-水(0.5-2.0∶1-5)混合溶液40ml，加热回流1-5小时，放冷，加氯仿振摇提取1-3次，每次10-30ml，合并氯仿液，加水20-40ml洗涤，弃去水液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1-3ml使溶解，加活性碳适量处理，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.5-2.0g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚(0.5-2.0∶0.5-2.0)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

含量测定：

淫羊藿的含量测定，色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(40-60∶60-40)为流动相；检测波长为200-300nm；理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.05-0.5mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取相当于原料药30-50g本发明药物组合物制剂内容物，研细，取约0.5-2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇10-20ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)0.5-2.0小时，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每日服用剂量含淫羊藿以淫羊藿苷计，不得少于1.0-5.0mg。