[发明专利]玫瑰海棠试管花的培养方法

权利要求书

1.一种玫瑰海棠试管花培养的方法，其特征在于采用玫瑰海棠叶片形成丛生芽的快速繁殖方法，在此基础上对其试管苗进行花芽诱导，它包括下列步骤：

（1）材料的选择：选取无病虫害、生长健壮的玫瑰海棠叶片；

（2）外植体灭菌处理：先从供试的玫瑰海棠植株上用剪刀剪下幼嫩的叶片，用自来水洗去泥沙后，水中加入洗洁精，再反复冲洗干净，于无菌条件下用75%的酒精浸泡50-80s，然后置于0.1%升汞溶液中消毒8-15min，最后用无菌水反复漂洗6-8次，用灭过菌的滤纸吸干表面水分；

（3）丛芽的诱导：将消毒后的叶片切成约1-2cm²的小方块，轻轻嵌入诱导培养基表面，培养基为MS培养基，补充6-苄基氨基嘌呤（6-BA）0.5～1.0mg/L，吲哚乙酸（IAA）1.5～2.0mg/L，PH值为5.8～6.0，10～12天时，叶表面细胞渐膨大，但不长愈伤组织，19～22天时在叶表面上零星地冒出几个绿色小芽点，至33～36天开始长出许多丛芽，培养条件为温度20-23℃，光照强度1500-2500Lux，光照时间5～8h/天；

（4）增殖培养：将从叶外植体得到的丛芽在无菌操作的条件下进行继代增殖，培养基为MS培养基，补充6-BA1.0～1.5mg/L，吲哚丁酸（IBA）0.2～0.5mg/L，PH值为5.8～6.0，23～26天,已长成3-4cm的小苗,并从苗基部又长出许多的小苗来，苗叶片浓绿、生长健壮，增殖倍数为9-12倍，培养条件为温度20-23℃，光照强度2000-2500Lux，光照时间10～12h/天；

（5）试管内成花培养：待增殖培养基中的小苗，长至3-4ｃｍ高，带4-5片小叶时，轻轻取出，将其从基部剪切，置于成花诱导培养基中，培养基为MS培养基，补充6-BA0.01～0.03mg/L，IAA0.1～0.2mg/L，多效唑（MET）0.1～0.3mg/L， PH值为5.8～6.0，培养2周时更换一次新鲜培养基，24～27天，顶芽分化出花蕾，33～36天花芽开放，侧芽陆续分化出花蕾，每苗出花1-3朵，花朵外观、色泽正常，成花率为70～75%，培养条件为温度20-23℃，光照强度2000-2500Lux，光照时间10～12h/天。

2. 根据权利要求1的玫瑰海棠试管花培养方法，其特征步骤（1）也可选用玫瑰海棠幼嫩的芽（顶芽或侧芽）；特征步骤（3）为：将消毒后的顶芽或侧芽，接种于诱导培养基，培养基为MS培养基，补充6-BA1.0～1.5mg/L，IBA0.1～0.3mg/L，PH值为5.8～6.0，10～12天芽开始生长，约1个月形成3-4cm的丛生小苗，培养条件为温度20-23℃，光照强度2000-2500Lux，光照时间11～12h/天；特征步骤（4）为：将从芽外植体得到的小苗进行继代增殖，增殖培养基同上，培养条件同上。