[发明专利]一种利用离子束生物工程诱变微藻生产二十二碳六烯酸的方法

权利要求书

1.一种利用离子束生物工程诱变微藻生产二十二碳六烯酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)化学诱变：选择隐甲藻作为出发藻种，按照常规方法经过斜面培养，接种子瓶在25℃培养室培养，把培养三天左右的种液中的微藻用人造海水溶液稀释，稀释度控制在100倍以内；

2)离子束诱变：把经上述处理过的藻液均匀涂布在无菌空白培养基上，加20-30％甘油保护，用无菌风风干，再将涂布有微藻的平板放置入离子注入机靶室内进行离子注入；

3)离子注入完成后，使用固体培养基进行单藻筛选，以摇瓶培养的二十二碳六烯酸产率为标准，以高出对照组10％-20％的摇瓶中挑选高产藻种，反复多次进行离子注入诱变和选育，以二十二碳六烯酸产率大于2g/L，即获得用离子束生物工程诱变的高产藻种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)包括如下步骤：将稀释所得到的微藻悬浮液按照特定比例与化学诱变剂亚硝基胍溶液混合，在25℃-30℃处理20-30分钟；然后在离心机中离心5分钟，去掉上清液，再加入人造海水。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤2)中靶室内的真空度大概在1x10^-2乇-1x10^-3乇；以N⁺为注入离子，离子注入能量为5-10Kev，注入剂量为2.5×10¹⁴-5×10¹⁴N⁺/cm²。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述亚硝基胍溶液的浓度为0.1g/L-0.3g/L，化学诱变剂与微藻悬浮液的体积比例为1∶10。