[发明专利]苦豆籽粕-双歧杆菌合生元研制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中草药渣粕与益生菌研制合生元的方法，特别指一种可以提高机体免疫力的苦豆籽粕-双歧杆菌合生元研制方法。

背景技术

当今，随着人类生活水平提高和自我保健意识的不断增强，人们已强烈意识到食品安全与人类健康的密切关系。因此，人们在选择畜禽产品时，不仅要求营养丰富，而且将安全、卫生、保健等提高到重要地位，其中最本质的一条就是无药物残留(抗生素、激素类及一些重金属类等有毒有害物质)。随着畜禽产品市场的国际化进一步加快，国际贸易间执行严格的药检制度，也给我国畜牧业带来了严峻挑战。发展无公害绿色畜牧业，增强我国畜禽产品的国际竞争力，已成为畜牧主管部门和生产企业的重要任务。研制不含抗生素、激素和重金属类有毒有害物质的饲料添加剂已显得尤为重要。但是，此产品必须以绿色无公害为前提，具有在进入动物机体胃肠道后能够维持其内部微生态的平衡；在体外不破坏整个“大生态系统”的特点。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种苦豆籽粕-双歧杆菌合生元研制方法，本研制方法将中药渣粕苦豆籽粕与益生菌两歧双歧杆菌组合制成微生态制剂合生元。

本发明要解决的技术问题由如下方案来实现：苦豆籽粕-双歧杆菌合生元分为三层：囊心为双歧杆菌，囊壁由海藻酸钠、脱脂乳粉和氯化钙组成，然后再使用中药制粒机在双歧杆菌微胶囊最外层包被苦豆籽粕，其活菌数要求至少达到7.67×10⁷cfu/g。制备合生元首先要对两歧双歧杆菌进行耐氧驯化，驯化后采用平板计数法测定其活菌数并进行了菌的种属鉴定，选择占总溶液体积4％-8％的苦豆籽粕和耐氧驯化后的两歧双歧杆菌为组合进行合生元的微胶囊制备，程序为：

(1)、将耐氧驯化后的两歧双歧杆菌冻干菌粉按3％-5％的比例加入到优化TPY液体培养基中活化，培养20h-40h，是活化的第一代，将培养好的第一代菌液吹打混匀，从中吸取占新优化TPY液体培养基体积5％的菌液，接到新优化TPY液体培养基中培养20h-40h，是活化的第二代，将培养好的第二代菌液吹打混匀，从中吸取占新优化TPY液体培养基体积5％的菌液，接到新优化TPY液体培养基中培养20h-40h，是活化的第三代，优化TPY液体培养基配方比例为：每100g优化TPY液体培养基中含有胰蛋白胨0.5g-3g、大豆蛋白胨0.5g-2g、葡萄糖0.5g-2g、乳糖0.5g-1.5g、酵母粉0.5g-2g、氯化镁0.03g-0.08g、氯化钠0.5g-1g、磷酸氢二钠0.5g-1g、磷酸二氢钾0.1g-0.2g、吐温-80 0.05g-0.16g、硫酸亚铁0.001g-0.002g、L-半胱氨酸盐酸盐0.02g-0.1g、水85-99g；

(2)、将上述经活化了的第三代菌液用3000rpm-6000rpm/min、2℃-8℃的离心机离心10min-30min，收集菌泥，在收集好的菌泥中加入浓度为6％-10％的脱脂奶粉保护剂中乳化8min-15min，脱脂奶粉的加入量为上述第三代菌液体积的40％-60％，然后与已高压蒸汽灭菌浓度为4％-6％的海藻酸钠混合，制备成菌悬液，海藻酸钠的加入量为上述第三代菌液体积的40％-60％，再用实验室自制微胶囊生成器通过挤压法制得双歧杆菌微胶囊，挤压滴入浓度为1％-3％的CaCl₂溶液中，同时以120rpm-180rpm/min的速度不停的搅拌，静置20min-40min将滴入的菌悬液固化；

(3)、将上述固化好的菌悬液用生理盐水清洗过滤2次-5次，真空冷冻干燥24h-72h得双歧杆菌微胶囊；

(4)、再使用中药制粒机在双歧杆菌微胶囊最外层包被浓度为4％-8％的苦豆籽粕，得到苦豆籽粕-双歧杆菌合生元颗粒剂，要求其活菌数至少达到7.67×10⁷cfu/g，苦豆籽粕与已包被微胶囊化后的双歧杆菌的质量比为1000g-1200g∶100g。

本发明的优点：本方法研制的苦豆籽粕-双歧杆菌合生元分为三层：囊心为双歧杆菌，囊壁由海藻酸钠、脱脂乳粉和氯化钙组成，然后再使用中药制粒机在双歧杆菌微胶囊最外层包被苦豆籽粕。苦豆籽粕-双歧杆菌合生元可降低平均日增重和日采食，对料肉比没有显著影响，能提高肠黏膜绒毛高度、黏膜厚度和V/C值(绒毛高度/隐窝深度)，降低隐窝深度，改善AA⁺肉仔鸡肠道组织结构的形态发育和肠道内环境。

附图说明

图1为本研制方法工艺流程图

具体实施方式

举实施例详述研制方法：

一、两歧双歧杆菌的耐氧驯化