[发明专利]一种从石榴废弃幼果或果壳中提取石榴皮苦素B的工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种从石榴下脚料，主要是废弃幼果或果壳中提取石榴皮苦素B的工艺。

背景技术

石榴，又名安石榴，是石榴科植物石榴punica granatum L.的果实，生产过程中，石榴坐果过多影响成品果的质量，需要间掉部分幼果，另外天气等自然原因也会产生大量的落地废弃幼果，还有石榴在食用、生产果汁、果酱等过程中，果壳部分白白扔掉，造成资源的大量浪费。

石榴幼果及果壳中含有大量有机酸，多酚，安石榴甙，石榴皮苦素B等成分。其中石榴皮苦素B是天然的植物抗生素，对金黄色葡萄球菌、史氏及福氏痢疾杆菌、白喉杆菌均有杀灭作用；对霍乱弧菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌及结核杆菌等有明显的抑制作用；对堇色毛癣菌、红色表皮癣菌、奥杜盎氏小孢子菌及星形奴卡氏菌等皮癣真菌有抑制作用；对病毒亦有抑制作用，且安全，不会产生耐药性。

目前，石榴提取物一般都是从石榴皮中提取安石榴甙，鞣花酸，多酚等物质，经过专利检索，未发现从石榴中提取石榴皮苦素B的专利。

发明内容

本发明提供一种从石榴下脚料(废弃幼果或果壳)中提取石榴皮苦素B的工艺。

本发明的技术解决方案是：一种从石榴废弃幼果或果壳中提取石榴皮苦素B的工艺，包括下述步骤：

第一步：前处理，将石榴幼果或果壳清洗，晾干粉碎；

第二步：提取，将粉碎后的原料投入提取罐中，加入5-15倍35-95％酒精提取1-3次，加热至50-95摄氏度，每次提取时间1-3小时；

第三步：浓缩过滤，将提取液浓缩回收酒精，浓缩液冷却后离心过滤；

第四步：膜处理，将离心后的浓缩液过陶瓷膜，再用2～5倍药液的去离子水洗膜，过完陶瓷膜后的药液，再过截留分子量1500的有机膜，收集流出液，再用1～3倍的去离子水洗有机膜，合并流出液；

第五步：层析，将过膜后的流出液通过有机树脂柱进行吸附，再用15-50％酒精洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得到石榴皮苦素B，含量大于15％。

第六步：制备色谱处理，将过层析的洗脱液进入制备色谱柱，用15-75％酒精梯度洗脱，收集洗脱液；

第七步：干燥，将洗脱液浓缩，干燥粉碎后，得到石榴皮苦素B，含量为95～98％。

本发明具有以下特点：①石榴提取物一般都是从石榴皮中提取安石榴甙，鞣花酸，多酚等物质，而本发明提取到了石榴皮苦素B；②通过控制具体步骤和参数可以得到不同含量的石榴皮苦素B；③生产过程无环境污染和毒害。

具体实施方式

实施例1：

第一步：前处理，将石榴幼果或果壳清洗，晾干粉碎；

第二步：提取，将粉碎后的原料投入提取罐中，加入5倍35％酒精提取3次，加热至60摄氏度，每次提取时间3小时；

第三步：浓缩过滤，将提取液浓缩回收酒精，浓缩液冷却后离心过滤。

第四步：膜处理，将离心后的药液过陶瓷膜，再用3倍药液的去离子水洗膜。过完陶瓷膜后的药液，再过截留分子量1500的有机膜，收集流出液，再用1.5倍的去离子水洗有机膜，合并流出液。

第五步：层析，将过膜后的流出液通过有机树脂柱进行吸附，再用去30％酒精洗脱，收集洗脱液；

第六步：浓缩干燥，将洗脱液浓缩干燥粉碎后得到石榴皮苦素B。经HPLC检测，与石榴皮苦素B对照品一致。含量大于15％。

实施例2：

第一步：前处理，将石榴幼果或果壳清洗，晾干粉碎；

第二步：提取，将粉碎后的原料投入提取罐中，加入10倍50％酒精提取3次，加热至70摄氏度，每次提取时间2小时；

第三步：浓缩过滤，将提取液浓缩回收酒精，浓缩液冷却后离心过滤。

第四步：膜处理，将离心后的药液过陶瓷膜，再用3倍药液的去离子水洗膜。过完陶瓷膜后的药液，再过截留分子量1500的有机膜，收集流出液，再用1.5倍的去离子水洗有机膜，合并流出液。

第五步：层析，将过膜后的流出液通过有机树脂柱进行吸附，再用去30％酒精洗脱，收集洗脱液，

第六步：制备色谱，将过层析的洗脱液进入制备色谱，梯度洗脱，收集洗脱液。

第七步：干燥，将洗脱液浓缩膏干燥粉碎后得到石榴皮苦素B，经HPLC检测，与石榴皮苦素B对照品一致。含量为95％。

实施例3：

第一步：前处理，将石榴幼果或果壳清洗，晾干粉碎；

第二步：提取，将粉碎后的原料投入提取罐中，加入15倍50％酒精提取1次，加热至80摄氏度，提取时间2小时；