[发明专利]制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法。

背景技术

林蛙皮含有丰富的具有特殊分子结构、功能复杂多样的生物活性物质，通常作为饲料和废弃物，将其开发利用可以提升林蛙的附加值，具有重要的应用价值及较大的开发利用潜力。

目前，市场上的胶原蛋白肽多是从鱼皮、猪皮、牛皮等动物皮肤中提取的，牛皮和猪皮经常受到疯牛病和禽流感等疾病的威胁，鱼皮同样受到水环境的污染，而林蛙生长在长白山山脉，本身就有抗恶劣环境的功能，蛙皮本身就有良好的呼吸性，富含胶原蛋白和微量元素，具有抑菌功能，使皮肤富于弹性、抗衰老等功效，与牛、猪和鱼皮相比具有价格廉价易得，功效显著之特点。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备林蛙皮胶原蛋白肽的方法。

本发明之方法是：

(1)、将干燥的蛙皮在清水中浸泡24小时，加入蛙皮湿重3倍的水，调pH8～10，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶的加入量为蛙皮湿重的0.5～1.0％，在50℃恒温条件下进行酶解反应4～6小时，在酶解过程中维持pH8～10，水解后100℃灭酶活10分钟，过滤；

(2)、过滤后得到的液体中加入液体重量的0.3～0.6％活性炭，于50℃条件下搅拌作用45分钟，pH4.5～6.5，过滤后4500r/min离心15分钟，得上清液，经膜设备纯化后进行喷雾干燥，即可制的微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽。

所得到的林蛙皮胶原蛋白肽之分子量为1500～3000Da。

其中步骤(1)是酶解林蛙皮；步骤(2)中的加入0.3～0.6％活性炭，在温度50℃和pH4.5～6.5条件下，搅拌作用45分钟，目的是为了脱色脱腥。

本发明的有益效果是：本发明之方法对林蛙皮进行了有效的利用。

附图说明

图1是本发明所制备的产物使用高压液相色谱所得到的色谱图。

具体实施方式

取300g林蛙皮，加水浸泡24小时，清洗后加林蛙皮湿重3的水，于水浴中调温至50℃并保持恒定，调节pH810，加入1.5m1～2.4ml碱性蛋白酶，边搅拌边酶解，计时4～6小时后终止酶解反应，沸水浴10分钟进行灭酶活处理，过滤残渣；过滤后得到的液体中加入3～6g活性炭，调节pH4.5～6.5，在50℃水浴中搅拌作用45分钟，过滤后4500r/min离心15分钟，取上清液，上膜设备进行纯化处理，最后喷雾干燥，制得的产物经过高压液相色谱检测，得到如图1所示生物色谱图，确定得到的产物是林蛙皮胶原蛋白肽。

所用碱性蛋白酶的活性为200000u/g。

所用碱性蛋白酶的编号为CAS9014-01-1。

所得到的林蛙皮胶原蛋白肽之分子量为1500～3000Da。