[发明专利]一种蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法有效

专利信息
申请号: 201110128914.2 申请日: 2011-05-18
公开(公告)号: CN102251010A 公开(公告)日: 2011-11-23
发明(设计)人: 刘立国;杨尉;林香瑶;刘柏楠 申请(专利权)人: 广州优锐生物科技有限公司
主分类号: C12P39/00 分类号: C12P39/00;C12P7/10;C12P19/14;C12R1/865;C12R1/84;C12R1/645;C12R1/72
代理公司: 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 万志香;胡杰
地址: 510663 广东省广州市广州高新*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 蔗渣 高效 同步 糖化 发酵 乙醇 方法
【权利要求书】:

1.一种蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:

(1)预处理:将干蔗渣于稀硫酸中浸泡,过滤后进行蒸汽爆破处理;汽爆蔗渣加入热水洗涤可溶性水解物,过滤得到水洗液和滤渣;滤渣加入低级醇-碱水混合体系,于高压反应釜中高温搅拌抽提,过滤分离,水洗,得抽提残渣和水洗液;

(2)浓缩脱毒:将步骤(1)的水洗液真空浓缩至原体积的1/6~1/10,加入含量为1wt%~5wt%的Ca(OH)2进行毒性抑制物脱除处理,过滤,调节滤液pH至中性,固液分离,得脱毒浓缩水洗液;

(3)酵母种子液制备:将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌种接入种子培养基,该种子培养基的主要成份为:葡萄糖10~20g/L、酵母膏2.0~5.0g/L、NH4Cl 1.0~2.0g/L、MgSO4·7H2O 0.2~0.5g/L、KH2PO40.5~1.0g/L;将戊糖发酵酵母菌种接入种子培养基,该种子培养基的主要成份为:木糖10~20g/L、酵母膏2.0~5.0g/L、NH4Cl 1.0~2.0g/L、MgSO4·7H2O 0.2~0.5g/L、KH2PO4 0.5~1.0g/L;于28℃~30℃培养16~24小时,分别控制酿酒酵母种子液、戊糖发酵酵母种子液的OD600值在0.8~1.0;将以上两种种子液混合配制即可得到酵母种子混合液;

(4)同步糖化共发酵:步骤(1)中的抽提残渣置于发酵罐中,加入步骤(2)的脱毒浓缩水洗液,再加入0.2M醋酸/醋酸钠缓冲液至pH=4.8~5.0,补加水至抽提残渣干重终浓度为4wt%~8wt%,同时加入主要具有以下组成的发酵培养基营养成分和无机盐:酵母膏0.2%~0.5%、蛋白胨0.1%~0.3%、NH4Cl 0.2%~0.4%、KH2PO4 0.1%~0.3%、MgSO4·7H2O0.05%~0.1%、CaCl2 0.05%~0.1%、非离子型表面活性剂0.01%~0.1%;发酵体系灭菌;体系中加入混合纤维素酶制剂,并按发酵体系体积的8%~12%接入步骤(3)中制备的酵母种子混合液,第一阶段于30℃~32℃、限制性供氧条件下糖化发酵20~30小时,第二阶段于36℃~38℃、厌氧条件下糖化发酵20~30小时;

(5)蒸馏/精馏:发酵液经过滤、蒸馏、精馏得到乙醇。

2.根据权利要求1所述的蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法,其特征在于,步骤(3)所述的戊糖发酵酵母菌种为树干毕赤酵母(Pichia stipitis)或嗜鞣管囊酵母(Pachysolen tannophilus)或休哈塔假丝酵母(Candida Shehatae)中的任意一种。

3.根据权利要求2所述的蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法,其特征在于,所述酵母种子混合液中酿酒酵母种子液与戊糖发酵酵母种子液的体积比为1∶0.5~2。

4.根据权利要求1所述的蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法,其特征在于,步骤(4)所述的非离子型表面活性剂是Tween80或Tween60或Tween40或Tween20或PEG-2000或PEG-4000或PEG-6000中的任意一种。

5.根据权利要求1-4任一项所述的蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法,其特征在于,步骤(4)所述的纤维素酶制剂是酸性纤维素酶、纤维二糖酶和木聚糖酶的混合;所述的酸性纤维素酶、纤维二糖酶和木聚糖酶的添加量分别是酸性纤维素酶10~40FPU/g抽提残渣,纤维二糖酶5~10CBIU/g抽提残渣,木聚糖酶10~20IU/g抽提残渣。

6.根据权利要求1-4任一项所述的蔗渣高效同步糖化共发酵产乙醇的方法,其特征在于,步骤(4)所述的限制性供氧条件是通过控制搅拌和通气速率,使得发酵体系溶氧浓度保持在1%~5%饱和水平。

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