[发明专利]一种生产蝉拟青霉孢子的培养基、培养方法和培养产物及其应用

权利要求书

1.一种生产蝉拟青霉分生孢子的固相培养基，所述固相培养基的原料组分包括：

麸皮       20～45重量份；

玉米粉     5～30重量份；

蔗糖       0.5～5重量份；

蚕蛹粉     0.5～5重量份；

KNO₃       0.1～3重量份；

KH₂PO₄     0.05～1重量份；

MgSO₄      0.05～0.8重量份；

H₂O        25～70重量份。

2.一种生产蝉拟青霉分生孢子的固相培养基，所述固相培养基的原料组分包括：

麸皮       40～70重量份；

营养液     30～60重量份；

贝壳粉     0.01～2重量份；

蚕蛹粉     0.01～5重量份；

其中，所述营养液中含有的组分名称及其重量百分比为：

KNO₃     0.1～5％；

蔗糖     1～20％；

KH₂PO₄   0.05～3％；

MgSO₄    0.01～0.5％；

柠檬酸铵 0.01～0.1％；

H₂O      余量。

3.一种生产蝉拟青霉分生孢子的液相培养基，所述液相培养基中含有的组分名称及其重量百分比为：

马铃薯    10～30％；

蔗糖      1～10％；

柠檬酸    0.01～1％；

H₂O       余量。

4.一种蝉拟青霉孢子的培养方法，该培养方法采用上述固相培养基，且所述培养方法包括如下步骤：

1)斜面菌种制备：将蝉拟青霉菌株接种到斜面培养基上，20～25℃下，培养3～5天；

2)种子液的制备：从斜面上刮取菌丝接种到以PDA液体为基础的三角瓶液体培养基中，20～25℃下，140～160rpm，培养3～5天即可制得蝉拟青霉种子液；

3)将步骤2)中制得的蝉拟青霉种子液按重量百分比为10～15％接入所述液相培养基中，在20～25℃下，140～160rpm，振荡发酵3～5天；

4)将步骤3)中制得的发酵液按重量百分比为3％～15％接入灭菌后的所述固相培养基中，在温度为18～23℃，湿度为50～90％的条件下，静置开放式培养15～25天。

5.如权利要求1中所述的生产蝉拟青霉分生孢子的固相培养基，其特征在于，所述固体培养基的制备方法为：先将玉米粉和麸皮煮熟，将蔗糖、KNO₃、KH₂PO₄、MgSO₄在水中溶解，再与蚕蛹粉按照比例混合均匀。

6.如权利要求4中所述的蝉拟青霉孢子的培养方法，其特征在于，步骤1)中，所述斜面培养基为PDA固体培养基。

7.如权利要求6中所述的蝉拟青霉孢子的培养方法，其特征在于，所述斜面培养基的制备方法为：马铃薯去皮洗净并切碎后与水混合，其中，马铃薯和水的重量比例为1∶(3～7)，灭菌后过滤得到马铃薯煮汁，然后在所述马铃薯滤液中加入琼脂2％，蔗糖2％，加热溶解后加水补足使得体积至原来马铃薯滤液体积，然后分装至试管，在121℃，1.05kg/cm²灭菌30min后摆斜面，冷却后使用。

8.如权利要求4中所述的蝉拟青霉孢子的培养方法，其特征在于，步骤4)中，所述静置开放式培养过程中，周围环境为万级洁净空间，同时通无菌风保证培养室内空气交换流通；进一步优选的，在静置开放式培养过程中，还需要在培养基上面覆盖多层厚度为0.1～0.3mm/层，含水量为饱和的无菌吸水纸进行固体发酵。