[发明专利]细菌选择性集成培养基专用培养皿及其使用方法

说明书

技术领域

本发明属于医学检验技术领域，具体涉及一种细菌选择性集成培养基专用培养皿及其使用方法。

背景技术

长期以来，鉴定细菌前需要以固体平板分离并获得纯培养，而制备平板多采用一次性塑料平皿或玻璃平皿浇注。目前，市场上有商品化生产的一次性塑料平皿出售，消毒后采用真空包装，打开即可使用，比较方便。但这种一次性塑料平皿同时也存在一些缺陷，如，平皿与平皿盖密封效果差，外包装一旦打开，必须一次用完，否则平皿易被污染，而临床实验室对这种一次性塑料平皿进行二次消毒比较困难，也难于保障消毒效果，只能弃去不用，从而造成浪费；由于平皿开口大，在制备成平板后，即使真空包装，外包装一旦打开，放置2-8℃冰箱也不能长时间储存，平板容易污染，琼脂中水分也易丢失，平板质量不稳定；特别是在临床细菌学检测或科研工作中，有时需要分离对特定抗生素具有不同耐药水平的细菌，同时需要含有不同浓度特定抗生素的多种选择性培养基，而每种浓度选择性培养基的一次实际需要量却不大，一般由实验室自行制备，制备过程比较繁琐。如果一次制备较多平板，在储存过程中，由于平皿开口大，平皿与平皿盖密封效果差，琼脂中水分易丢失，容易导致选择性平板中抗生素浓度改变。因此，这种选择性培养基保存期更短，甚至要求需要时临时配制，分别制备和保养不同浓度选择性培养基，给临床细菌学检测和科研工作带来不便，甚至在临床细菌学检验中难以常规开展，培养基保存期短，也在很大程度上限制了商品化批量生产。

接种细菌后，平板需要在温箱中孵育18-24h(选择耐药细菌孵育时间往往更长)，在孵育过程中细菌容易在平皿内形成大量气溶胶。由于平皿开口大，平皿与平皿盖密封效果差，气溶胶会扩散到整个孵育箱中，打开孵育箱门后，也会造成实验室内空气污染，尤其是培养一些能够引起烈性传染病的细菌(例如，鼠疫耶尔森菌、炭疽杆菌)，以及能够产生气生菌丝的病原性真菌(如曲霉菌)，其气溶胶危害更大，如果造成医院内感染或人群间传播，将带来灾难性后果。分离对特定抗生素具有不同耐药水平的细菌(如万古霉素耐药金黄色葡萄球菌)， 同时需要制备、接种和孵育多个选择性培养基平面，其问题更加复杂。细菌培养过程中产生气溶胶对周围环境造成污染，主要是由于一次性平皿设计缺陷造成的，一直是一个难以克服的棘手问题。

本发明的目的是，提供一种制备选择性集成培养基的专用培养皿。含有不同浓度特定抗生素的多种培养基集成在一个专用培养皿内，制备成一个选择性培养基复合平板，能够简便、快速、一次性检出对特定抗生素呈异质性耐药、中介、低水平耐药及高水平耐药的细菌，操作简单，储存、孵育方便。该选择性集成培养基利用琼脂稀释法的原理，能够准确预测细菌MIC和定量检测耐药克隆的突变率，同时能够获得单个菌落，用于进一步细菌学研究；本发明的专用培养皿，可以解决普通一次性平皿制备的平板由于平皿与平皿盖密封效果差，导致储存、孵育过程中易污染，以及琼脂水分易丢失、选择性培养基中抗生素浓度容易发生改变，保存期短等问题；同时，本发明专用培养皿制备的平板，为密封系统，亦可改变琼脂营养成分而制备成其他培养基平板，用于引起烈性传染病细菌以及能够产生气生菌丝病原性真菌的培养。培养过程中产生的气溶胶不会扩散到培养箱或周围环境，而且由于在观察实验结果时也无需打开培养基，因而能更有效避免微生物气溶胶等生物危害，安全、环保。

发明内容

本发明细菌选择性集成培养基专用培养皿包括一个四面体、具螺旋开口的培养皿(图1，图2)和一个有内螺旋平皿盖(图3)两部分组成。培养皿主体部分为四面体，四面体最佳的长、宽、高分别为长8cm、宽8cm，高12cm；四个对称平面(长12mm，宽8mm)上均设计一个向平皿外部凸出的长方体，长8cm，宽6cm，厚4mm(如图2)；在四个对称面分别用不同颜色做点状标记或文字标记以示区分；四面体培养皿上平面向上隆起，设一个向上凸出的圆形开口，外直径6cm，高2.5cm，凸出的圆形开口部分的外侧有螺旋，可以与平皿盖内侧螺旋匹配并旋紧；平皿盖为圆形，内直径6cm，内高2.0cm(图3)与四面体培养皿向上凸出的圆形开口相当，内侧有螺旋与培养皿的圆形开口处匹配，平皿盖内附一层大小适宜的软橡胶垫，有助于旋紧时不漏气。