[发明专利]一种检测植物激素β-3-吲哚乙酸的电化学免疫传感方法

权利要求书

1.一种检测植物激素β-3-吲哚乙酸（IAA）的电化学免疫传感方法，其特征在于包括以下步骤：（1）在金电极表面制备无试剂型IAA电化学免疫传感器；（2）制作标准工作曲线；（3）对实际植物样品中IAA含量进行检测。

2.根据权利要求1所述的无试剂型IAA电化学免疫传感器由以下步骤制备：将处理干净的金电极首先浸入0.02 M 半胱胺溶液中4℃下反应6h，使其表面形成致密的自组装单层膜；水洗晾干后，在室温条件下将其浸入10 mg/mL的酵母细胞溶液中反应4h，取出，水洗，晾干；然后滴加40ml的0.5 mg/mL IAA 抗体溶液(PBS, pH 7.5) 于金电极表面，37℃下温育1h；取出水洗，晾干；最后，采用30ml的10mg/mLBSA溶液封闭晶振表面的非特异性反应位点；按照此方法即获得无试剂型IAA电化学免疫传感器，修饰好的免疫传感器电极探针可浸入适宜pH值的PBS溶液中于4℃下保存备用。

3.根据权利要求1所述的标准工作曲线的制作，其特征在于：将修饰有抗体的工作电极（即制备好的无试剂型IAA电化学免疫传感器）置于不同浓度的抗原（IAA）溶液中孵育60min (37℃)，在相同条件下测定其循环伏安曲线，响应电流差值与IAA浓度成正比；为获得一个稳定的实验结果，对生物传感器表面的电流连续检测直到稳态，获得稳定值；改变IAA标准溶液的浓度，按上述步骤测定一系列不同浓度的IAA标准溶液，用免疫传感器表面的循环伏安电流变化值与IAA浓度绘制标准工作曲线。

4.根据权利要求1所述的检测植物样品中IAA含量的方法，其特征在于：先测定制备好的无试剂型IAA电化学免疫传感器表面循环伏安电流值；然后取处理好的样品溶液取常规量滴到已制备好的无试剂型IAA电化学免疫传感器，37℃环境下反应60min；对免疫传感器表面的循环伏安电流连续检测直到稳态，获得稳定数值；将响应电流差值与绘制好的标准工作曲线对照获得植物样品溶液中IAA含量的数值。