[发明专利]一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺

权利要求书

1.一种用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)混合液：将CBP液和α-淀粉酶液按体积比为5∶1-2混合均匀，得混合溶液；取啤酒酵母和上述混合液置反应罐中，搅拌均匀；

2)在搅拌下调pH值至6.5-7.5，在37-42℃条件下搅拌反应23h-25h，得酶解啤酒酵母液；

3)上述酶解啤酒酵母液经离心、超滤浓缩，得浓缩液；

4)上述浓缩液经干燥得乙醇脱氢酶酶粉。

2.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，所述步骤1)的α-淀粉酶液由以下方法制得：混合步骤3)的残渣和步骤4)的残渣得混合物，将所述混合物加入pH6.0-pH7.0、0.01mol/L磷酸缓冲液，混合物的质量g与磷酸缓冲液的体积ml之比为1∶2，搅拌0.5h，经离心、超滤浓缩，得α-淀粉酶液。

3.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，步骤2)中的所述啤酒酵母为废弃啤酒酵母泥，即生产啤酒后过滤出的啤酒酵母。

4.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的工艺，其特征在于，步骤1)中，所述啤酒酵母的质量g与混合溶液的体积ml之比为1∶2。

5.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，所述步骤3)具体包括：

301)上述酶解啤酒酵母液抽入离心机，经1200-1500r/min常温离心收集上清液，残渣压滤再收集上清液，合并两次上清液，残渣保留备用；

302)上述合并上清液抽入离心机，经14000-17000r/min常温离心收集上清液，残渣保留备用；

303)将步骤302)所得的上清液经超滤浓缩，得浓缩液。

6.根据权利要求1所述的用酶解法制备乙醇脱氢酶的方法，其特征在于，所述步骤4)具体为，上述浓缩液转入冷冻干燥机中冷冻干燥，或用-15℃以下的冷丙酮洗涤脱水干燥，得乙醇脱氢酶酶粉。