[发明专利]水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的应用、组合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于化妆品领域，涉及水蛭用于改善黑眼圈或眼袋的应用，以及以水蛭为主要原料，用于改善黑眼圈或眼袋的组合物及其制备方法。

背景技术

水蛭是一味传统中药，史载于《神农本草经》，历代本草均有记述。中医认为它有破血、逐瘀通经的功能，历来用于治疗症瘕、痞块、血瘀闭经、跌打损伤。中国药典2000年版收载为水蛭科动物蚂蟥WhitmanpigraWhitman、水蛭HinudenipponicaWhitman或柳叶蚂蟥WhitmaniaacranulataWhitman的干燥体。水蛭中主要成分有：1、直接作用于凝血系统的成分，包括凝血酶抑制剂，以及其它抑制血液凝固的物质，如水蛭素(Hirudin)、菲牛蛭素(Bufrudin)、森林山蛭素(Haemadin)等。2、其它蛋白酶抑制剂及其它活性成分，如溶纤素(Hementerin)、待可森(Decorsin)等。3、其他成分：水蛭主含蛋白质，此外含有17种氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，还含有Zn、Mn、Fe、Co、Cr、Se、Mo、Ni等14种元素，还有吻蛭素、肝素、抗血栓素、氨基酸成分等营养成分。

目前，已有较多化妆品中使用到水蛭的提取物或其主要成分水蛭素。如水蛭的提取物可用于祛斑、祛痘、润肤、嫩肤、美白、预防皮肤衰老、增强皮肤弹性之功效。

由于黑眼圈及眼袋的形成原因较多，睡眠不足、疲劳、肾气虚损、精气不足均易出现黑眼圈与眼袋，而且二者常常同时出现，非常影响个人形象，但是现有方法对于改善和完全祛除黑眼圈和眼袋并不明显。现有报道中，尚未见单独应用水蛭于改善或祛除黑眼圈和眼袋的报道与应用。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种水蛭的新用途，用于改善或祛除黑眼圈和眼袋。

为了更好的应用水蛭这一新用途，本发明所解决的第二个技术问题是提供以水蛭为主要原料制备的用于改善或祛除黑眼圈和眼袋的组合物。本发明组合物主要活性成分为水蛭提取物、天然水蛭素与重组水蛭素中任意一种，可选择加入珍珠、决明子、茯苓中一种或几种组成作为活性成分形成复方。

本发明组合物的活性成分重量配比如下：

其中，珍珠、决明子提取物、茯苓提取物中至少一种不为0。

优选重量配比为：

本发明所采用的活性成分分别是：

1、水蛭提取物的常规制备方法为：取新鲜水蛭全体绞碎制成水蛭浆，按体积配比：水蛭浆1份：浓盐酸0.01～0.1份、丙酮1～10份的配料提取，取丙酮液，残渣再用丙酮浸提，过滤，合并丙酮提取液，干燥即可。

2、天然水蛭素提取工艺为：取新鲜水蛭唾液，加入丙酮，冷却，取上清液离心，残渣加三氯乙酸溶解，取样上柱层析：

(1)阴离子交换柱层析：取适量DEAE-C52加蒸馏水使其膨胀，按常规方法依次用NaOH-NaCl混合液、稀盐酸溶液及NaOH-NaCl混合液各浸泡30min后用蒸馏水洗涤至中性，装柱后，用pH4.6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液平衡，上述三氯乙酸溶液上样进行梯度洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集洗脱液，将有活力部分集中于透析袋中用甘油浓缩，再用双缩脉法测总蛋白含量，继续以下的柱层析；

(2)凝胶过滤柱层析取适量的Sephadex-G25加蒸馏水浸泡4h，按常规方法用NaOH-NaCl混合液浸泡0.5h，抽滤除去碱液并用蒸馏水洗涤至中性，加热煮沸除去气泡。装柱，用pH7.4的缓冲液平衡，将上述有活力洗脱液的浓缩液上样、洗脱并用记录仪绘出洗脱曲线，分段收集有活力洗脱液；回收溶剂，干燥后即可。

或直接购买市售产品。

3、重组水蛭素(专利号：01105798.X)，其分子的第32至35位和第53至66位氨基酸序列为：Arg32-Gly33-Asp34-Ser35；Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58-Ile59-Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66。

4、决明子提取物的制备方法为：取决明子药材，粉碎至粗粉，用60～85％乙醇回流提取2～3次，每次6～12倍量溶剂，提取时间为0.5～2.5h，合并提取液，干燥即可。

5、茯苓提取物的制备方法为：取茯苓药材，用药材6～12倍量的60～85％乙醇回流提取2～3次，每次0.5～2.5h，合并提取液，干燥即可。