[发明专利]用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒及抗体检测方法

权利要求书

1.用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述ELISA试剂盒包括固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液，所述抗体捕获剂为重组鸭瘟病毒UL16蛋白，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

2.根据权利要求1所述的用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述重组鸭瘟病毒UL16蛋白的浓度为大于或等于1.25μg/ml。

3.根据权利要求1所述的用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述酶标二抗作10000倍体积稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗鸭IgG。

4.根据权利要求1所述的用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，其特征在于：所述抗体捕获剂与所述酶标二抗的加入量为等体积。

5.用权利要求1-4任一项所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法，其特征在于，具体步骤为：

a 固相抗原的制备：将抗体捕获剂与固相支持物连接，用封闭液封闭，洗涤去除未结合的抗原及杂质，得固相抗原；

b 一抗结合：将待检标本通过保温反应使与所述固相抗原结合形成固相抗原抗体复合物，洗涤去除固相载体上杂质；

c 二抗结合：将所述酶标二抗稀释液与所述固相抗原抗体复合物结合，得抗原—抗体—二抗复合物；

d 显色：在步骤c所得抗原—抗体—二抗复合物加入色原底物避光显色后，加入终止液终止反应得显色样品液；

e 检测并判定：将步骤d所述显色样品液用酶标仪测OD_450nm值, 判断结果。

6.根据权利要求5所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法，其特征在于，步骤B中所述待测标本为作160倍体积稀释的血清。

7.根据权利要求5所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法，其特征在于，步骤e中,将步骤d所述显色样品液用酶标仪测OD_450nm值, 所述OD_450nm值＞0.598为阳性，所述OD_450nm≤0.598则为阴性。

8.根据权利要求5所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法，其特征在于：所述方法还包括空白对照实验和阴性对照实验。

9.根据权利要求5所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法，其特征在于：步骤a中所述重抗体捕获剂、步骤b中所述待检标本及步骤c中所述酶标二抗的加入量为等体积。

10.根据权利要求5所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法，其特征在于：步骤a中所述重组鸭瘟病毒UL16蛋白液、步骤b中所述待测标本及步骤c中所述酶标二抗加入量为100μL。