[发明专利]从宣木瓜果实中提取齐墩果酸及制备齐墩果酸标准品的方法

权利要求书

1.一种制备齐墩果酸标准品的方法，其特征在于：

（一）、首先进行齐墩果酸样品液的制备：

（1）将经过筛选的宣木瓜果实、清洗、切片、阴干后，在40℃-60℃ 下真空干燥，然后再粉碎，过40-45目筛，得宣木瓜果实粉；

（2）将宣木瓜果实粉加入到乙醇溶液中，在30℃-50℃下，超声波辅 助提取30-50min，经多次提取后，将提取液真空浓缩，得粗提物，并 回收溶剂，宣木瓜果实粉与乙醇溶液的重量比为 1：（10-15），乙 醇溶液的浓度为60-85%；

（3）将所得粗提物加水混溶后，再加入等量正丁醇的饱和水溶液萃取 多次，收集有机层并真空浓缩，得浸膏状物质，同时回收正丁醇；

（4）将步骤（3）所得的浸膏状物质用甲醇溶解，经滤膜过滤，即得 齐墩果酸样品液 ；

（二）、然后，进行以下步骤：

（1）大孔树脂初步纯化处理  将（一）中制得的齐墩果酸样品液浓 缩，用95%乙醇溶解，以0.9-1.1mL/min流速上样，静止3～4h后，先用 蒸馏水洗去水溶性杂质,再分别用20%、50%、95%乙醇溶液洗脱，洗脱 流速为1.5mL/min，收集95%乙醇洗脱液，回收乙醇，蒸干，即得皂甙 粗品；

（2）硅胶柱层析  将经大孔树脂层析初步纯化的粗品用甲醇溶解后 上柱，并用50%和95%甲醇洗脱，分段收集洗脱液，将95%甲醇洗脱液浓 缩蒸干，即得白色针状结晶；

（3）将白色针状结晶溶于甲醇中，用HPLC制备色谱分离精制，按制备 色谱图出峰时间分管收集洗脱液，将HPLC检测纯度大于95%的流份合并 ，氮吹去净溶剂，即得齐墩果酸标准品，HPLC检测纯度的流动相V:V为 乙腈:水=95: 5；检测波长：210nm；柱温：25℃。

2.根据权利要求1所述的制备齐墩果酸标准品的方法，其特征在于：（二 ）中步骤（3）所述的HPLC制备色谱的条件为：洗脱液为甲醇水，甲醇 水中甲醇与水的体积比为85：15 ；体积流量：10mL/min；检测波长 ：210nm ；柱温：25℃；进样量：1.5mL。