[发明专利]一种油菜雄性不育恢复基因分子标记的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于油菜育种和分子生物学领域，更具体地涉及一种油菜异源细胞质雄性不育恢复基因的分子标记的制备方法，同时还涉及一种油菜异源细胞质雄性不育恢复基因的分子标记在油菜杂交种亲本选育中的应用。

背景技术

目前，杂交油菜的推广面积已占油菜生产总面积的60％以上。细胞质雄性不育是生产油菜杂交种的主要授粉控制系统。我国生产上使用的杂油菜有70％左右为细胞质雄性不育杂种，基本上是华中农业大学1972年从引进品种“波里马”中发现的波里马细胞质雄性不育(Pol CMS)配制的。Pol CMS的育性易受温度影响，低温下产生微量花粉，不育株可以自我繁殖，导致配制杂交种时一定比例的不育株存在，使杂种纯度下降，其中的不育株结实率低，影响杂交种产量潜力的发挥，增加杂交油菜利用的风险性。我国目前研究和应用的其他雄性不育细胞质有陕2A CMS、MI CMS、Nca CMS等，这些不育细胞质均是在芸薹属栽培种中经自然变异或种间杂交鉴定出来的，属于同源雄性不育胞质，均有育性不够稳定的缺点，应用时存在杂种纯度难以保证的问题，且其完全保持系和完全恢复系都不容易筛选，大多数油菜品种都是不恢不保的类型(李殿荣.甘蓝型油菜三系选育初报.陕西农业科学，1980，(1)：26-29；傅寿仲，戚存扣，唐继红.甘蓝型油菜细胞质雄性不育系MI CMS的选育.作物学报，1989，17(2)：151-156.刘贵华，蔡明，盛晓燕.甘蓝型油菜NCa雄性不育材料的选育及其在甘蓝型油菜中的恢保关系.中国农业科学，1997，30(3)：61-65)。国外通过转移萝卜不育细胞质得到的育性较为稳定的萝卜质雄性不育材料(Bannerot H，Boulidard L，Cauderon Y andTempe J.Transfer of cytoplasmic male sterility from Raphanus sativus to Brassicaoleracea.Proc.Eucarpia Meeting Cruciferae：1974，52-54)，但在利用过程中出现恢复系难找、恢复基因与不良品质性状连锁的问题，使得该不育系的育种利用进程缓慢(Delourme R.，Foisset N.，Horvais R.，Barret P.，Champagne G.，Cheung W.Y.，Landry B.S.，Renard M.Characterisation of the radish introgression carrying the Rforestorer gene for the Ogu-INRA cytoplasmic male sterility in rapeseed(Brassicanapus L.).1998，Theor Appl Genet 97：129-134)。从1974年不育系创建成功，到1999年打破恢复基因与不良品质性状的连锁，直至2000年以后才不断育成双低杂交油菜品种，实际应用进程花了将近30年的时间(Primard-Brisset C，Poupard JP，Horvais R，Eber F，Pelletier G，Renard M，Delourme R，A new recombined double lowrestorer line for the Ogu-INRA cms in rapeseed(Brassica napus L.).Theor ApplGenet.2005；111(4)：736-46)。生产上大面积应用单一细胞质生产杂交油菜存在流行性病害发生的危险，利用新的细胞质雄性不育系统对保障杂交油菜的可持续性发展具有重要意义。