[发明专利]利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法

权利要求书

1.利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶按以下步骤实现：一、称取发酵基料、水、发酵氮源和微量元素，然后混匀，得到发酵初培养基；二、向发酵初培养基中第一次加入魔芋粉，然后接入微生物种子液，其中第一次魔芋粉的加入量为发酵初培养基的2％w/v；三、在37℃±2℃、搅拌速率为300r/min、通气量为4L/min的条件下发酵至微生物菌体密度至OD₆₀₀值为4.5，再第二次加入魔芋粉，然后在37℃±2℃、搅拌速率为300r/min、通气量为4L/min的条件下再发酵8～40h，即完成利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶；其中，步骤三中第二次魔芋粉的加入量为发酵初培养基的1％w/v；步骤一中发酵基料为麸皮和豆饼粉，麸皮与豆饼粉的质量比为(7～8)∶(2～3)。

2.根据权利要求1所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一中发酵氮源为蛋白胨。

3.根据权利要求2所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一中微量元素为MgSO₄和KH₂PO₄，发酵初培养基中MgSO₄的质量浓度为0.02％、KH₂PO₄的质量浓度为0.5％。

4.根据权利要求1、2或3所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一中发酵基料、水、发酵氮源与微量元素的质量比为(60～90)∶3000∶90∶(15～17)。

5.根据权利要求4所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一微生物种子液中菌体浓度为10⁷个/mL，微生物种子液的接种量为发酵初培养基体积的6.7％，微生物种子液中的微生物为地衣芽孢杆菌HDGLJT-01(Bacillus licheniformisHDGLJT-01)，地衣芽孢杆菌HDGLJT-01保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO：M 209288。

6.利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶按以下步骤实现：一、称取发酵基料、水、发酵氮源和微量元素，然后混匀，得到发酵初培养基；二、向发酵初培养基中第一次加入魔芋粉，然后接入微生物种子液，其中第一次魔芋粉的加入量为发酵初培养基的1％w/v；三、在37℃±2℃、搅拌速率为300r/min、通气量为4L/min的条件下发酵至微生物菌体密度至OD₆₀₀值为4.5，再第二次加入魔芋粉，然后在37℃±2℃、搅拌速率为300r/min、通气量为4L/min的条件下再发酵8～40h，即完成利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶；其中，步骤三中第二次魔芋粉的加入量为发酵初培养基的2％～3％w/v；步骤一中发酵基料为麸皮和豆饼粉，麸皮与豆饼粉的质量比为(7～8)∶(2～3)。

7.根据权利要求6所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一中发酵氮源为蛋白胨。

8.根据权利要求7所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一中微量元素为MgSO₄和KH₂PO₄，发酵初培养基中MgSO₄的质量浓度为0.02％、KH₂PO₄的质量浓度为0.5％。

9.根据权利要求6、7或8所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一中发酵基料、水、发酵氮源与微量元素的质量比为(60～90)∶3000∶90∶(15～17)。

10.根据权利要求9所述的利用魔芋粉微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的方法，其特征在于步骤一微生物种子液中菌体浓度为10⁷个/mL，微生物种子液的接种量为发酵初培养基体积的6.7％，微生物种子液中的微生物为地衣芽孢杆菌HDGLJT-01(Bacillus licheniformisHDGLJT-01)，地衣芽孢杆菌HDGLJT-01保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO：M 209288。