[发明专利]旋覆花黄酮在制备预防和治疗阿尔茨海默氏病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于药物研究领域，具体涉及旋覆花黄酮在制备防治阿尔茨海默氏病的药物中的新用途。

背景技术

阿尔茨海默氏病(Alzheimer`s disease，AD)又称为老年痴呆症，是由Aβ42的沉积和由此形成的聚集体导致的。过量产生的Aβ42易发生沉积，形成的Aβ42聚集体对神经细胞具有毒性，最终导致老年痴呆症。因此，减轻脑内Aβ42的负荷、抑制Aβ42的细胞毒性已成为防治阿尔茨海默氏病的根本方法。长期以来，阿尔茨海默氏病的治疗主要是依靠西药，如胆碱酯酶抑制剂、美金刚和尼莫地平等。这些药物只能在短期内改善症状，并不能延缓患者的病情发展。目前尚无有效抑制Aβ42的生成和Aβ42细胞毒性的药物，因而不能从根本上遏制阿尔茨海默氏病的发生和发展。

Aβ42是由膜蛋白淀粉样前体蛋白(缩写为APP)经膜蛋白β-分泌酶和γ-分泌酶顺次水解产生的。在细胞膜上，APP首先经膜蛋白β-分泌酶催化水解产生初级降解产物(缩写为C99)、C99再经膜蛋白γ-分泌酶催化水解产生了Aβ42。γ-分泌酶的催化组分是膜蛋白早老素(缩写为PS)，全长的PS(缩写为PS-F)在生物体内细胞膜上被自动裂解为N端片段和C端片段(缩写为PS-N、PS-C)，PS-N、PS-C再共同组成了γ-分泌酶的催化部位。在细胞膜上PS与C99结合并催化C99水解产生了Aβ42。因此，凡是能够抑制PS与C99相互作用的药物组分都有可能成为防治阿尔茨海默氏病的药物。历史上传统的中药在治疗痴呆症方面表现出一定的疗效，同时中药具有毒性低，安全的特点。因此从天然植物药物组分中筛选出具有抑制Aβ42细胞毒性或抑制PS与C99相互作用的组分是从根本上遏制阿尔茨海默病的一个重要思路。目前尚无有效抑制Aβ42细胞毒性的天然植物药物，更没有同时抑制Aβ42的细胞毒性和PS与C99相互作用的天然植物药物。

发明内容

旋覆花黄酮(Inula flavonoid)是存在于天然植物旋覆花(Inula Flower)中的一种水溶性物质，属于2一苯基色原酮类化合物，在抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等方面有较明显的疗效。有关旋覆花黄酮的生物活性的研究较少，从前对旋覆花黄酮的认识主要集中在它清除自由基和抗氧化活性方面，本发明利用Aβ42毒性诱导的细胞模型，发现了旋覆花黄酮(缩写为XH)具有显著抑制或中和Aβ42细胞毒性的作用，同时对PS与C99的相互作用也具有明显的抑制效应，进一步本发明确定了旋覆花黄酮在制备预防和治疗阿尔茨海默氏病药物中的新用途。

附图说明

图1.旋覆花黄酮对Aβ42细胞毒性的抑制作用，其中1：旋覆花黄酮抑制组，2：Aβ42损伤组，3：空白对照组；

图2.旋覆花黄酮对Aβ42细胞毒性的中和作用，其中1：旋覆花黄酮中和组，2：Aβ42损伤组，3：空白对照组；

图3.pEGFP-C3-PS1表达载体的测序谱图(一)；

图4.pEGFP-C3-PS1表达载体的测序谱图(二)；

图5.pET28a-C99表达载体的测序谱图；

图6.纯化得到的C99的SDS-PAGE图谱，其中1为蛋白质Marker；2为C99；

图7.旋覆花黄酮对靶细胞COS7在C99基质上粘附的影响，其中空载体：只转染了空载体的靶细胞COS7在C99基质上的粘附，PS1-F：转染了pEGFP-C3-PS1的靶细胞COS7在C99基质上的粘附，XH：旋复花黄铜，无药：不加旋复花黄铜；

图8.pcDNA3.1(+)-C99表达载体的测序谱图；

图9.旋覆花黄酮对PS1与C99相互作用的影响，其中；1：加入旋覆花黄酮；2：阴性对照；3：阳性对照。

具体实施方式

实施例1：旋覆花黄酮抑制Aβ42细胞毒性的作用分析

(1)Aβ42毒性诱导的细胞模型的建立