[发明专利]以柑橘果渣为原料生产细菌纤维素的方法

权利要求书

1.中间葡糖醋杆菌Gluconacetobacter intermedius CIs26，其菌株保藏号为CGMCC No.4663。

2.以柑橘果渣为原料生产细菌纤维素的方法，其特征在于按以下步骤进行：

(1)柑橘果渣的预处理：将正常柑橘果实或残次柑橘果实经热烫、去皮、榨汁后取其果渣，与水按重量1∶1-20比例混合、打浆制备成果渣浆，添加果胶酶至300-2800U/mL处理2h后，以800目滤布过滤、取滤液，添加蔗糖0-200g/L，调节pH值4.0-6.5，121℃灭菌15min成柑橘果渣预处理液，备用；

(2)柑橘果渣预处理液的酵母发酵：将含糖30g/L的糖水预热至38℃后，与干酵母按体积重量20mL∶1g比例混合、搅拌并保温20min，待温度降至≤34℃后，保持1.5h成酵母种子液；按1-5mL/L的接种量将酵母种子液接入步骤(1)柑橘果渣预处理液中，在20-30℃下培养2-5d，至发酵液的可溶性固形物含量低于20g/L时停止发酵，离心去除菌体与沉淀物，取上清液，备用；

(3)生产发酵培养液的配制：在步骤(2)的上清液中添加酵母粉0-15g/L，蔗糖20-120g/L，硫酸铵1-15g/L后，调节pH值4.0-6.5，100℃煮沸灭菌5min成生产发酵培养液；

(4)细菌纤维素的生产：将中间葡糖醋杆菌Gluconacetobacter intermedius CIs26CGMCC No.4663接入种子培养液中，经2次转接至菌体密度≥5×10⁸CFU/mL时作为种子液；将种子液按50-150mL/L接种量接入生产发酵培养液中后，置于200mm×250mm的浅层无菌托盘中至该液厚度为1.5-5cm，表面覆盖无菌纱布，在培养室保持通风、26-32℃条件下发酵培养至菌膜不再增厚时结束；

(5)细菌纤维素的处理：将步骤(4)发酵所得菌膜即细菌纤维素凝胶取出，用清水洗凈粘附于该凝胶下方的培养液殘余物后，浸泡于80-100℃的0.1NNaOH溶液中并保温15-60min；冷却后将细菌纤维素凝胶取出，以清水反复清洗至pH值为6.0-7.0；根据工业化要求，或切成小块保存于10g/L的醋酸溶液中，或将其干燥、磨粉后密封包装即成细菌纤维素产品。

3.按权利要求1所述的方法，其特征在于所述的柑橘果实为温州蜜柑、脐橙或胡柚之中任选一种或两种的混合果实。

4.按权利要求1所述的方法，其特征在于所述的干酵母为：安琪酵母有限公司所产的酿酒高活性干酵母或葡萄酒酵母或广西丹宝利酵母有限公司所产的常温酒酵母中的任选一种。

5.按权利要求1所述的方法，其特征在于所述的种子培养液为：酵母粉3g、蛋白胨3g、葡萄糖20g，柑橘渣水补足至1L，自然pH值，121℃灭菌15min。