[发明专利]一种白桦树皮取物及其制备方法和医疗用途

说明书

技术领域

本发明公开一种白桦树皮取物及提取方法，同时还提供了其在医疗用途，涉及中医药学技术领域。

背景技术

目前临床上常将糖尿病分为胰岛素依赖型（IDDM，Ⅰ型糖尿病）和非胰岛素依赖型（NIDDM，Ⅱ型糖尿病）两类，其中Ⅱ型糖尿病在糖尿病中占90%。WHO预计，由于人口老龄化、肥胖、不健康的饮食以及缺乏运动的生活方式，到2025年，糖尿病患者的数目将由1995年的1.35亿上升为3亿。

Ⅱ型糖尿病的特征是胰岛素敏感组织如骨骼肌、肝、脂肪组织对胰岛素作用的抵抗。虽然其具体机制尚不清楚，但胰岛素信号在其传导通路中的减弱甚至阻断必定是直接关系。PTPases在胰岛素信号通路中多个环节起作用，如将自身磷酸活化的IR去磷酸化，从而降低受体激酶活性；或将IRS-1、IRS-2、Shc等胰岛素受体的底物中蛋白酪氨酸残基至去磷酸化，从而负调控胰岛素作用受体后通路。特定PTPases和胰岛素通路中的酪氨酸激酶间的酶活性不平衡可能是引起Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗的原因。因此，通过寻找选择性作用于该通路中PTPases的抑制剂抑制其活性，加强和延长胰岛素信号，成为越来越受重视的治疗Ⅱ型糖尿病的新途径。

PTP1B选择性抑制剂的研究取得了一定的进展，但大多研究局限于肽类和类肽化合物，例比如根据PTP1B去磷酸化的底物序列设计的抑制剂EEDE（F2PMP）M 、Glu-F2PMP-F2PMP，虽然这些肽类化合物具有较强高的选择性和较强的抑制活性，但它们的不易穿透细胞膜和其肽类磷酸结构使很难成为药物候选化合物。最近，在非肽类PTP1B抑制剂的报道中2-羧甲氧基苯甲酸类化合物对PTP1B有很强的抑制作用，更重要的事，其中(2S)-2-[4′-(2-苄基-苯并呋喃)-3-联苯-4-氧]-3-苯基-丙酸化合物不仅对PTP1B有很强的选择抑制性，还对降低ob/ob小鼠血浆中的葡萄糖和胰岛素水平有显著作用。这是第一例从药理学上直接证明PTP1B抑制剂具有抗糖尿病活性的证据[Malamas, M. S. et al. J. Med. Chem. 2000, 43, 1293-1310]。这为我们从天然资源里寻找高效、高选择性的小分子非肽类PTP1B抑制剂提供了机遇。

白桦树(Betula platyphylla Suk）为桦木科乔木植物，对土壤适应性强，喜酸性土，沼泽地、干燥阳坡及湿润阴坡都能生长。

本发明是首次从白桦树皮中分离得到抑制蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B活性组分，经多次药理实验研究表明，该组分具有显著抑制蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B的活性及降血糖作用，经文献检索，未见该类植物具有此方面的报道。

发明内容

本发明提供一种白桦树皮提取物，为一种新的组合物，具有抑制蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B的活性，可以降低血糖。

本发明还进一步提供白桦树皮提取物的制备方法，适用于工业化生产。

本发明的另一个目的是提供了白桦树皮提取物及其从中分离的活性组分的医疗用途，作为抑制蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（PTP1B）的抑制剂和胰岛素增敏剂，可用于治疗各种糖尿病、肥胖症及其它由此引发的并发症。

本发明提供的白桦树皮提取物是通过以下方法得到的：

1）将干燥切碎的白桦树(Betula platyphylla Suk）树皮，用5-10倍量有机醇（80%或以上浓度），加热回流提取2-4次，每次30min-60min，合并提取液；

2）提取液减压浓缩回收有机醇，至浓缩，合并浓缩液，放凉，加入1倍量水，析出沉淀，过滤或离心取沉淀，得提取浓缩物；

3）提取浓缩物用1-2倍量水调节混悬液后，分别用1-2倍量二氯甲烷萃取3次，合并萃取液；

4）萃取液减压浓缩回收二氯甲烷，至浓缩，合并浓缩液，放凉，干燥；

5）干燥品研磨后经过200-300目硅胶柱层析，先用1-2倍量正己烷为流动相进行洗脱；之后用3-5倍量二氯甲烷与甲醇按10：1比例的洗脱液洗脱，收集该洗脱液，将洗脱液常温减压浓缩，干燥，得本发明提取物。

上述的有机醇包括甲醇、乙醇。

用HPLC法测定发明提取物中羽扇豆醇的含量不低于20%。

对所得本发明提取物进行了蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制活性试验，表明其具有明显的抑制活性。