[发明专利]耐热β-甘露聚糖酶、其编码基因、重组菌和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种耐热β-甘露聚糖酶、其编码基因、重组菌和应用。

背景技术

甘露聚糖是植物半纤维素的重要组分，是由β-1，4-D吡喃甘露糖连接而成的线状多糖。甘露聚糖具有高亲水性，在单胃动物的消化道内大量吸水，增加了消化道内容物的粘度，抵抗胃肠的蠕动，直接影响动物对营养物质的消化和吸收。豆粕中甘露聚糖的含量在1.2％以上。近年来，随着豆类产品(豆粕等)在动物饲粮中的广泛应用，甘露聚糖的抗营养作用也越来越受到重视。目前，我国大豆进口量为3000万吨以上，其中80％以上用于饲料。

甘露聚糖的完全酶解需要β-甘露聚糖酶、β-甘露糖苷酶、β-葡糖苷酶、α-半乳糖苷酶和脱乙酰酶的协同作用，其中β-甘露聚糖酶在饲料中的应用比较广泛。β-甘露聚糖酶是一类能水解甘露聚糖的半纤维素酶类，广泛存在于动植物和微生物中。有报道，在大猪饲料中添加β-甘露聚糖酶可以提高平均日增重10％以上；在肉鸡饲料中添加β-甘露聚糖酶可以提高饲料的转化率4％-6％，提高鸡的抗病力，改善肉用鸡的健康状况。

目前已知的β-甘露聚糖酶耐热性很差，无法抵抗饲料制粒温度，限制了β-甘露聚糖酶在饲料中的使用。因此，研制耐热性的β-甘露聚糖酶具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种耐热β-甘露聚糖酶、其编码基因、重组菌和应用。

本发明提供的耐热β-甘露聚糖酶(MANN-cx1蛋白)，获自硫色曲霉β-甘露聚糖酶随机突变后筛选得到的一株突变体，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-甘露聚糖酶活性的由序列1衍生的蛋白质。

为了使(a)中的MANN-cx1蛋白便于纯化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1标签的序列

  标签  残基数  序列  Poly-Arg  5-6(通常为5个)  RRRRR  Poly-His  2-10(通常为6个)  HHHHHH

  FLAG  8  DYKDDDDK  Strep-tagII  8  WSHPQFEK  c-myc  10  EQKLISEEDL