[发明专利]一种治疗泌尿系统疾病的药物组合物的检测方法

权利要求书

1.一种治疗泌尿系统疾病的药物组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别方法和/或含量测定方法中的一种或几种：

该组合物是由如下重量配比的原料药制成的：

粉萆薢200-400重量份    石菖蒲30-90重量份    甘草100-200重量份

乌药50-120重量份       益智仁(炒)20-80重量份；

鉴别方法：

(1)粉萆薢

取本药物组合物制剂内容物适量，研细，取相当于生药材1-3g的细粉，加2mol/L的盐酸20-60ml，回流1小时，滤过，药渣用10％碳酸钠溶液洗至中性，用20ml乙醚超声处理10-40分钟，滤过，滤液浓缩至0.5-2.0ml，作为供试品溶液；另取粉萆薢对照药材0.5-2.0g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，分别吸取对照药材溶液、供试品溶液各5-20ul，点于同一硅胶G薄层板上以三氯甲烷-丙酮(6-15∶0.3)为展开剂，饱和5-15分钟展开；取出晾干后喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

(2)薯蓣皂苷元

取本药物组合物制剂内容物适量，研细，取相当于生药材1-3g的细粉，置100mL具塞锥形瓶中，加乙醇水浴回流提取2-4次，每次20mL，每次20-40min，合并提取液，回收溶剂至干，残渣加2mol/L盐酸10-30mL，沸水回流2-4h，取出，冷却，移置分液漏斗中，加氯仿萃取2-4次，每次10mL，合并氯仿液，水浴蒸至约3mL，作为供试品溶液；取薯蓣皂苷元对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5-2.0mg的对照品溶液；分别吸取对照品溶液3-8ul，供试品溶液5-15ul点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(5-10∶3)为展开剂，展开，取出晾干后喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)甘草

取本药物组合物制剂内容物适量，研细，取相当于生药材1-3g的细粉，加乙醚20-60mL，加热回流0.5-2.0h，滤过，药渣加甲醇10-40mL，超声10-40min，滤过，滤液蒸干，残渣加水40mL使溶解，用水饱和正丁醇提取2-4次，每次20mL，合并正丁醇液，用10-30mL水洗涤，蒸干，残渣加甲醇3mL使溶解，作为供试品溶液；取甘草对照药材1g，供试品溶液的制备同法制得对照药材溶液；分别吸取对照药材溶液3-8ul，供试品溶液各5-15ul点于同一硅胶G薄层板，以乙酸乙酷-甲酸-冰醋酸-水(10-20∶1∶1∶1-5)为展开剂展开，取出晾干后喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；在供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(4)乌药

取本药物组合物制剂内容物适量，研细，取相当于生药材1-3g的细粉，加氯仿20-60mL，超声20-40min过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5-2.0mL使溶解，作为供试品溶液；取乌药对照药材0.5-2.0g，与供试品溶液的制备同法制得对照药材溶液；分别吸取对照药材溶液、供试品溶液各5-15ul点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酷(3-8∶1)为展开剂展开，取出晾干后喷以2％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(5)益智仁(炒)

取本药物组合物制剂内容物适量，研细，取相当于生药材1-3g的细粉，加石油醚(60～90℃)20-40ml，超声处理20-60分钟，滤过，滤液挥干，残渣加1ml无水乙醇使溶解，作为供试品溶液；取益智仁对照药材1-3g，与供试品溶液制备同法制成对照药材溶液；分别吸取对照药材溶液、供试品溶液各5ul，点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上以环己烷-乙酸乙酯(5-12∶2)为展开剂，饱和5-15分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(6)石菖蒲

取本药物组合物制剂内容物适量，研细，取相当于生药材1-3g的细粉，加乙醚20-40ml，超声处理20-60分钟，滤过，滤液浓缩至约0.5-2.0ml，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材0.5-2.0g，与供试品溶液的制备同法制得对照药材溶液；分别吸取对照药材溶液、供试品溶液各3-10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(5-12∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主荧光斑点；

含量测定

(1)粉萆薢的含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-乙氰(30∶40-100)为流动相；检测波长为150-250nm；理论板数按薯蓣皂甙元峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备精密称取干燥至恒中的薯蓣皂甙元对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1-0.5mg的对照品溶液；

供试品溶液的制备取本药物组合物制剂内容物，研细，精密称取相当于生药材0.5-2.0g的药粉，置100ml具塞三角瓶中，加乙醇水浴回流三次，每次10-30ml，每次20-40min，合并提取液，回收溶剂至干。残渣加2mol·L^-1盐酸10-30mL，沸水回流2-4h，取出冷却，移至分液漏斗中，加氯仿萃取三次，每次5-15ml，合并氯仿液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经0.45um为孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1g含粉萆薢以薯蓣皂甙元(C₂₇H₄₂O₃)计，不得少于1.5mg；

(2)甘草的含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.2mol/L醋酸铵-冰醋酸(28∶50-90∶2)为流动相；检测波长为250nm；理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品约2-6mg，精密称定，置20ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含甘草酸单铵盐对照品0.1-0.3mg，折合甘草酸为0.0980-0.2939mg)；

供试品溶液的制备取本药物组合物制剂内容物，研细，精密称取相当于生药材0.5-3g的药粉，置具塞三角瓶中，精密加入流动相10-40ml，称定重量，超声处理(250W，20kHz)20-40分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每1g含甘草以甘草酸(C₄₂H₆₂O₁₆)计，不得少于2.5mg。