[发明专利]一种纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：包括试剂A和试剂B，其中：试剂A包括水溶性钙盐、缓冲剂和生理盐水；试剂B包括水溶性磷酸盐、缓冲剂和生理盐水；所述的试剂A和/或试剂B中还包括一种或二种以上的生物友好型聚合物。

2.根据权利要求1所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于，其中的试剂A中：水溶性钙盐的摩尔浓度为0.01～1mol/L，缓冲剂的摩尔浓度为0.01～1mol/L，生物友好型聚合物的质量浓度为0～10g/L，pH值为6～8；其中的试剂B中：水溶性磷酸盐的摩尔浓度为0.00006～0.06mol/L，缓冲剂的摩尔浓度为0.01～1mol/L，生物友好型聚合物的质量浓度为0～10g/L，pH值为6～8。

3.根据权利要求2所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于，其中的试剂A中：水溶性钙盐的摩尔浓度为0.1～0.5mol/L，缓冲剂的摩尔浓度为0.1～0.5mol/L，生物友好型聚合物的质量浓度为1～5g/L，pH值为6.5～7.5；其中的试剂B中：水溶性磷酸盐的摩尔浓度为0.0006～0.003mol/L，缓冲剂的摩尔浓度为0.1～0.5mol/L，生物友好型聚合物的质量浓度为1～5g/L，pH值为6.5～7.5。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：所述的水溶性钙盐为氯化钙、硝酸钙或乙酸钙。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：所述的水溶性磷酸盐为磷酸铵、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、磷酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：所述的缓冲剂为4-羟乙基哌嗪乙磺酸、N-(2-羟乙基)哌嗪-N′-2-乙烷磺酸(HEPES)、柠檬酸或三羟甲基氨基甲烷。

7.根据权利要求1至3中任一项所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：所述的生物友好型聚合物为具有生物降解性和生物相容性的均聚物或共聚物。

8.根据权利要求7所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：所述的均聚物为聚乙二醇(PEG)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸羟基乙酸(PLGA)、聚天冬氨酸(PASP)、聚赖氨酸(PL)、聚谷氨酸(PGA)或聚乙烯亚胺(PEI)；所述的共聚物为所述的均聚物单体形成的无规、交替、嵌段或接枝共聚物。

9.根据权利要求8所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂，其特征在于：所述的共聚物为聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PLA)共聚物或聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸(PEG-PLGA)共聚物。

10.一种权利要求1所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)制备试剂A：将水溶性钙盐、缓冲剂或水溶性钙盐、缓冲剂和生物友好型聚合物加入生理盐水中，搅拌使完全溶解，然后调节pH值；

b)制备试剂B：将水溶性磷酸盐、缓冲剂或水溶性磷酸盐、缓冲剂和生物友好型聚合物加入生理盐水中，搅拌使完全溶解，然后调节pH值；

c)先将基因与试剂A混合均匀，然后加入试剂B混合均匀。

11.权利要求1所述的纳米磷酸钙/聚合物复合基因转染试剂在生物医药领域中的应用。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述的生物医药领域为基因转染或基因治疗。