[发明专利]高效液相色谱法测定感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物含量测定领域，具体涉及一种高效液相色谱法测定感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯含量的方法。

背景技术

感冒清胶囊(国药准字Z33020858)为经国家食品药品监督管理局批准生产的中西药复方制剂品种，该产品处方由中药提取浓缩干膏粉与西药成分对乙酰氨基酚等组成复方制剂。感冒清胶囊在国家标准中的处方为：南板蓝根940g，大青叶400g，金盏银盘660g，岗梅860g，山芝麻460g，对乙酰氨基酚24g，穿心莲叶40g，盐酸吗啉呱24g，马来酸氯苯那敏1g。临床功能主治疏风解表、清热解毒，用于风热感冒、发烧、头痛、鼻塞流涕、咽喉肿痛、全身酸痛等症。穿心莲叶为中成药，具有清热解毒、凉血、消肿的功效，用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、毒蛇咬伤等，穿心莲内酯是其有效成分。

感冒清胶囊现有国家法定标准(标准号为WS3-B-3717-98)中仅有一个西药成份对乙酰氨基酚含量测定和理化鉴别项目，而对其中起主要作用的中药活性成分未有定性定量的检查测定，造成有检验标准但不能检验相应主成分的缺陷。因此，有必要提出一种测定感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯含量的方法，以保证药品质量，提高、完善感冒清胶囊的检验标准，适应新时期药检工作的需要。

发明内容

本发明的目的在于，提出一种高效液相色谱法测定感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯含量的方法，以准确可靠地测定感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯的含量。

为了实现上述目的，本发明提出了一种高效液相色谱法测定感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯含量的方法，该方法采用的色谱条件为：

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱；

以甲醇和水的体积比为52∶48作为流动相；

柱温为25℃；

检测波长为225nm；

流速为1.0mL/min；

进样量为20μL。

本发明方法对感冒清胶囊中脱水穿心莲内酯含量测定结果准确、可靠，方法简便、科学，试验时间短，无干扰峰，理论塔板数达到4000以上，分离度、拖尾因子、不对称度均符合中国药典求，检测结果良好。

具体实施方式

1.仪器与试药

采用LC-10ATvp日本岛津高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器，美国制造P/N(7725i)手动进样器，浙江大学N-2000数据工作站，柱温箱，电子天平为十万分之一分析天平，DD80型超声脱气机。脱水穿心莲内酯对照品从中国药物生物制品检定所购买(批号：0854-200204，供含量测定，含量100.0％)，感冒清胶囊样品自产(批号为060801、060901、061001，装量为0.5g/粒)，甲醇为一级色谱纯(产地：天津四友精细化学品有限公司出品)，水为双蒸馏水(自制)，其他试剂为分析级试剂。

2.色谱条件

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱，尺寸为4.60mm×250mm，填料为Hypersil ODS2，填料粒径为5μm，以甲醇和水的体积比为52∶48作为流动相，水优先采用双蒸馏水，流动相在使用前先用超声脱气机超声脱气处理30min，以去除流动相中的气泡，柱温为25℃，紫外检测器的检测波长为225nm，流速为1.0mL/min，进样量为20μL。

对于流动相的选择，进行了几次摸索试验，先以甲醇和水的体积比为65∶35作为流动相，脱水穿心莲内酯出峰时间提前在9分钟左右，脱水穿心莲内酯峰与附近的峰分离度达不到1.5，不符合药典规定要求，结果不是很理想。后依次把甲醇和水的体积比分别调为60∶40、52∶48进行试验，以体积比为52∶48试验时，脱水穿心莲内酯峰在19分钟左右，此时洗脱的峰不受前后峰的影响，分离度符合药典要求，理论塔板数4000以上，其他要求均符合药典上的规定。最后把甲醇和水的体积比定为52∶48，能够有效分开干扰峰，试验结果满意。

3.样品含量测定

对照品溶液的制备：精密称取经脱水穿心莲内酯对照品3.0mg置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备：分别取感冒清胶囊样品20粒(批号：060801、060901、061001)，研细，精密称取细粉1.000g，置锥形瓶中，精密加甲醇25mL，称定重量，用超声脱气机进行超声脱气处理，超声脱气处理的功率为200W，频率为45KHz，时间为40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

在上述色谱条件下，取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，再经分析计算得出脱水穿心莲内酯的含量，结果如表1所示。