[发明专利]中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法有效
| 申请号： | 201110081077.2 | 申请日： | 2011-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN102154194A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 张婷;陈捷;王秉丽 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12N1/14;C12R1/885 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王锡麟;王桂忠 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 规模 高产 孢子 液体 发酵 制备 方法 | ||
1.一种中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征在于，由以下步骤组成：
步骤一，取木霉菌的三种菌株T.koningiopsis、T.atroviride或T.harzianum，分别接种于种子菌培养基上进行常温培养，之后分别接种于种子液中进行发酵培养，得种子菌发酵液；
步骤二，将种子菌发酵液接种于中试水平的液体培养基中，经二次发酵得到液体发酵物。
2.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的PDA培养基，其组分及含量为：马铃薯200g/L、葡萄糖20g/L、琼脂粉25g/L余量为水，该PDA培养基通过以下方式制备得到：将马铃薯去皮后切成块加水并煮沸，然后用纱布过滤并向滤液中加葡萄糖和琼脂粉，最后补水定容。
3.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的种子液培养基的组分及含量为：马铃薯200g/L、葡萄糖20g/L，余量为水，该种子液培养基通过以下方式制备得到：将马铃薯去皮后切成块加水并煮沸，然后用纱布过滤并向滤液中加葡萄糖，最后补水定容。
4.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的常温培养是指：在28℃环境下培养3-4天。
5.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的发酵培养是指：在pH 6～7，28℃，溶氧量20-30％以及130-140r/min的旋转环境下发酵7天。
6.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的接种是指：按每200L液体培养基添加1.2L种子菌发酵液的比例进行接种。
7.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的液体培液基的组分含量为：玉米粉40-60g/L，硫酸铵450-550mg/L，余量为无菌水。
8.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的玉米粉的粒度为40目以下。
9.根据权利要求1所述的中试规模木霉高产厚垣孢子液体发酵制备方法，其特征是，所述的二次发酵是指：在pH 3-4，28.0℃-28.8℃，溶解氧20-30％，135-140r/min的旋转环境下发酵5-8天。
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