[发明专利]刺梨果活性提取物及其制备方法、检测方法和应用

权利要求书

1.刺梨果活性提取物的制备方法，其特征在于：将刺梨果按常规工艺提取，过滤，弃去刺梨渣，滤液减压浓缩，用有机溶剂萃取，回收有机溶剂，加水分散，过滤，水洗沉淀，合并滤液，将滤液浓缩干燥得活性提取物B，将沉淀进行干燥得活性提取物A。

2.根据权利要求1所述刺梨果活性提取物的制备方法，其特征在于：取刺梨干果或鲜果，用6～20倍重量的20～95％乙醇或甲醇水溶液回流或浸渍提取1～4次，每次0.5～3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇或甲醇至无醇味，加水定容至相对密度1.05～1.25的浸膏，用有机溶剂萃取1～4次，有机溶剂与水的比例为0.5～2∶1，合并有机溶剂层，回收有机溶剂，加水超声或加热进行分散，抽滤，水洗沉淀1～5次，合并滤液，将滤液浓缩干燥得活性提取物B，将沉淀进行干燥得活性提取物A。

3.根据权利要求1或2所述刺梨果活性提取物的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为正丁醇、乙酸乙酯或氯仿。

4.根据权利要求1或2所述刺梨果活性提取物的制备方法，其特征在于：所述干燥采用微波真空干燥、减压真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。

5.如权利要求1-4中任一项所述制备方法制备得到的刺梨果活性提取物A，其中总三萜含量大于50％。

6.如权利要求1-4中任一项所述制备方法制备得到的刺梨果活性提取物B，其中总三萜含量大于45％，(+)-儿茶素含量不少于5％。

7.如权利要求5所述刺梨果活性提取物A的检测方法，其特征在于：所述检测方法为刺梨果活性提取物A中总三萜类化合物的含量测定方法，该方法是以熊果酸对照品为对照，采用香草醛-冰醋酸-高氯酸显色比色法测定。

8.如权利要求6所述刺梨果活性提取物B的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括刺梨果活性提取物B中总三萜类化合物的含量测定方法和黄酮类化合物(+)-儿茶素的含量测定方法；总三萜类化合物的含量测定方法是以熊果酸对照品为对照，采用香草醛-冰醋酸-高氯酸显色比色法测定；(+)-儿茶素的含量测定方法是以(+)-儿茶素对照品为对照，以0.04mol/L枸橼酸溶液∶N，N-二甲基甲酰胺∶四氢呋喃＝45∶8∶2为流动相的高效液相色谱法。

9.根据权利要求7或8所述刺梨果活性提取物A或B的检测方法，其特征在于：具体的总三萜类化合物的含量测定方法为：精密称取真空干燥至恒重的熊果酸对照品5.4mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；称取干燥的刺梨果活性提取物A或B样品，用甲醇定容至50ml，取0.5ml显色测吸光度，作为供试品溶液；取0.5ml供试品溶液，采用香草醛-冰醋酸-高氯酸显色法，在544nm最大吸收波长下测定吸光度；根据熊果酸对照品的线性回归方程由吸光度计算出浓度C，然后由浓度C计算出样品中总三萜类化合物的含量。

10.根据权利要求8所述刺梨果活性提取物B的检测方法，其特征在于：具体的黄酮类化合物(+)-儿茶素的含量测定方法为：照《中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.04mol/L枸橼酸溶液∶N，N-二甲基甲酰胺∶四氢呋喃＝45∶8∶2为流动相；检测波长为280nm；柱温35℃；理论板数按儿茶素峰计算不低于3000；

对照品溶液的制备取(+)-儿茶素对照品，精密称定，加甲醇∶水＝1∶1混合液制成每1ml含(+)-儿茶素0.15mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备取提取物B粉末20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇∶水＝1∶1混合液40ml，超声处理20分钟，并加甲醇∶水＝1∶1混合液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；

刺梨果活性提取物B中(+)-儿茶素含量不少于5％。

11.如权利要求5或6所述刺梨果活性提取物A或B在制备治疗恶性肿瘤疾病的药物、辅助药物或者保健食品添加剂中的应用。

12.如权利要求5或6所述刺梨果活性提取物A或B作为α-葡萄糖苷酶抑制剂在制备预防或治疗糖尿病的药物、保健品或者食品添加剂中的应用。

13.根据权利要求11或12所述刺梨果活性提取物A或B的应用，其特征在于：所述的药物剂型为硬胶囊、片剂、口服液、颗粒剂、软胶囊或滴丸剂。