[发明专利]蜂胶黄酮前体脂质体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于蜂产品加工工艺技术领域，具体涉及一种蜂胶黄酮前体脂质体及其制备方法。

背景技术

蜂胶是蜜蜂从植物幼芽或树干破伤部位采集的树脂，并混入其上颚腺分泌物和蜂蜡等加工而成的一种具有芳香味的胶状固形物。蜂胶具有抗菌防腐、抗病毒、抗氧化、活血化淤、软化血管、降血脂、抗肿瘤、增强人体免疫力、促进组织再生等作用；

蜂胶的成分相当复杂，其中的黄酮化合物是主要的活性物质。蜂胶有“黄酮化合物宝库”之美誉，现已从蜂胶中分离鉴定的黄酮化合物包括白杨素、芹菜素、金合欢素、槲皮素、高良姜素、芦丁、山萘酚、山萘甲黄素、鼠李素、松鼠素等70多种，其中5,7-二羟基-3,4-二甲基黄酮和5-羟基-4,7-二甲氧基双氢黄酮是蜂胶的特有成分。不同产地的蜂胶由于地理环境和气候及采集的季节不同，其活性成分的含量也会有很大差异。蜂胶的功能活性与其中有效成分化合物的含量，特别是黄酮含量密切相关。因此，黄酮类物质含量是蜂胶最主要的质量指标；

蜂胶及其蜂胶黄酮具有很强的生理活性，但其难溶于水，且光、热、氧气、金属离子和体系pH值很容易影响到黄酮的稳定性。蜂胶生理活性与黄酮含量的量效关系以及蜂胶、蜂胶黄酮的不稳定性，决定了研究者们的工作主要从提取分离工艺、活性成分的保护以及蜂胶新剂型研究等方面展开，以期确定最佳的提取和保护方法，使其免受各种不利因素的影响，从而最大限度地保护其生理功效成分，延长货架期；

迄今为止，国内外未见有关于蜂胶黄酮前体脂质体制备的报道。脂质体制剂是以磷脂等两性物质为基础的制剂，是将待包封的活性物质包封于类脂质双分子层的薄膜中间或者是包封于类脂质双分子层的内水相中得到的。由于活性物质被包封在脂质体中，具有长效、靶向等优点，脂质体制剂在新产品开发方面表现出极大的开发潜力。许多研究机构和制药公司都致力于脂质体制剂产品的开发，其中一个重要的应用是保护所包封的活性物质不受外界环境的破坏。将不同冻干保护剂加入到制得的脂质体分散液中，冷冻干燥，得到蜂胶黄酮前体脂质体，可增加脂质体的物理化学稳定性，减小产品的体积，便于贮存和运输，同时方便食品加工及应用，扩展其应用领域。

发明内容

本发明的目的为了增强蜂胶黄酮在胃液强酸体系中的稳定性，达到提高生物利用率和更好的保健效果，以及更方便地贮存、运输，和在更广泛的食品体系中应用，提供一种蜂胶黄酮前体脂质体及其制备方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：该种蜂胶黄酮前体脂质体，其特征在于：以蜂胶黄酮为芯材，壁材由卵磷脂、胆固醇和吐温80组成，制成的蜂胶黄酮前体脂质体为粉状；

所述的一种蜂胶黄酮前体脂质体，其特征在于：卵磷脂与胆固醇重量比为大于等于4；吐温80与卵磷脂重量比为大于等于1.2；

所述的一种蜂胶黄酮前体脂质体，其特征在于：芯材蜂胶黄酮含量为卵磷脂含量的2.5重量%或以上；

所述的一种蜂胶黄酮前体脂质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）配制蜂胶黄酮水溶液：将蜂胶黄酮去离子水中，控制蜂胶黄酮的浓度小于等于12mg/mL，得水相；

（2）配制脂质无水乙醚溶液：将卵磷脂、胆固醇按质量比10:1-10:2溶于无水乙醚，控制卵磷脂在其乙醚溶液中的浓度小于等于25 mg/mL，得有机相；

（3）乳状液形成：将蜂胶黄酮水溶液和脂质无水乙醚溶液混合，再于冰水浴中超声至混合物变为单相分散体系，即形成了油包水型乳状液；

（4）脂质体生成：将形成的油包水型乳状液转移至旋转蒸发烧瓶中，30℃-40℃水浴中旋转蒸发除去无水乙醚，去除无水乙醚时有凝胶生成，进一步旋转蒸发，凝胶塌陷，形成混悬液后，加入含吐温80的水溶液，使溶液中含有的吐温80与卵磷脂的质量比为1:4 -1.25:1，将该体系在30℃-40℃水浴下旋转水合15-30分钟；即得蜂胶黄酮纳米脂质体分散液；

（5）冻干保护剂的加入：将葡萄糖、甘露糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖或海藻糖之一的冻干保护剂，以冻干保护剂:磷脂质量比大于等于6:1的量加入蜂胶黄酮纳米脂质体分散液中；

（6）前体脂质体的生成：将加入了冻干保护剂的蜂胶黄酮纳米脂质体分散液在冷冻干燥机中，于-39℃以下，真空23.8Pa以下冷冻干燥24 h以上；冷冻干燥产品即为粉状蜂胶黄酮前体脂质体；

（7）蜂胶黄酮前体脂质体的复水：取0.2g蜂胶黄酮前提脂质体，于PH 6.8-PH7.0的PBS缓冲液中分散，形成分散液; 复水后，包封芯材的保留率81%-96%；平均粒径为20nm -400nm。

本发明与现有技术相比的有益效果：