[发明专利]细梗香草皂苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物制备技术领域，尤其涉及一种细梗香草皂苷的制备方法。

背景技术

细梗香草为报春花科珍珠菜属植物Lysimachia capillipes Hemsl.的干燥全草。植物中含有丰富的皂苷类成分，其中含量较高的两个皂苷——细梗香草皂苷B、 C含量可达2-7%。其结构为13-28环氧齐墩果烷型三萜皂苷。

经药理学实验表明，细梗香草皂苷单体以及总皂苷均能明显抑制肿瘤细胞株的生长，可用于预防、治疗癌症，有望开发成新药或功能保健食品。以细梗香草皂苷B和细梗香草皂苷C为主的皂苷占总皂苷含量的70%以上，因此，以上述两个皂苷作为评价总皂苷的指标成分，具有一定的代表意义。

关于细梗香草皂苷的分离方法，仅见于植物化学研究中的常规硅胶柱色谱溶剂梯度洗脱分离，而对其中的皂苷B和皂苷C的定向制备分离，目前尚未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种细梗香草皂苷的制备方法。

细梗香草皂苷的制备方法的步骤如下：

1)将细梗香草药材加入体积百分比浓度为50-80%的乙醇浸泡后，加热回流提取1-3次，每次1-2小时，得到细梗香草提取液；

2)提取液浓缩离心，上清液加入大孔树脂柱，加入3-6倍柱体积蒸馏水洗脱除去糖类，再以体积百分比浓度为60-80%乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后得细梗香草粗总皂苷；

3)细梗香草粗总皂苷用反相中压柱，以体积百分比浓度为40-65%甲醇多次洗脱纯化，得到质量百分比含量为80-90%的细梗香草皂苷B和质量百分比含量为80-90%的细梗香草皂苷C，并分别上Sephadex LH-20凝胶柱，除去杂质，收集洗脱液，得到质量百分比含量为95-100%的细梗香草皂苷B和质量百分比含量为95-100%的细梗香草皂苷C。

细梗香草皂苷的制备方法的步骤如下：

1)将细梗香草药材加入体积百分比浓度为70%的乙醇浸泡后，加热回流提取3次，每次1.5小时，得到细梗香草提取液；

2) 提取液浓缩离心，上清液加入大孔树脂柱，加入4倍柱体积蒸馏水洗脱除去糖类，再以体积百分比浓度为70%乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后得细梗香草粗总皂苷；

3)细梗香草粗总皂苷用反相中压柱，以体积百分比浓度为45%甲醇洗脱除去非皂苷类杂质，再以体积百分比浓度为52%甲醇洗脱，得到质量百分比含量为80-90%细梗香草皂苷C，再以体积百分比浓度为60%甲醇洗脱，得到质量百分比含量为80-90%的细梗香草皂苷B，并分别上Sephadex LH-20凝胶柱，除去杂质，收集洗脱液，得到质量百分比含量为95-100%的细梗香草皂苷B和质量百分比含量为95-100%的细梗香草皂苷C。

本发明以皂苷为目标物质，除去了大量干扰物质。通过反相硅胶梯度洗脱,分别制得较高纯度的细梗香草皂苷C和细梗香草皂苷B。本发明设计的方法简单，可重复性强，适用于工业化生产。通过该方法制备的细梗香草皂苷C和细梗香草皂苷B均具有显著的抗肿瘤活性，可以作为抗肿瘤药物的原料。

附图说明

图1是细梗香草皂苷C液相图谱;

图2是细梗香草皂苷B液相图谱。

具体实施方式

实施例1

1)将细梗香草药材加入体积百分比浓度为50%的乙醇浸泡后，加热回流提取1次，每次1小时，得到细梗香草提取液；

2)提取液浓缩离心，上清液加入大孔树脂柱，加入3倍柱体积蒸馏水洗脱除去糖类，再以体积百分比浓度为60%乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后得细梗香草粗总皂苷；

3)细梗香草粗总皂苷用反相中压柱，以体积百分比浓度为40%甲醇多次洗脱纯化，得到质量百分比含量为80%的细梗香草皂苷B和质量百分比含量为80%的细梗香草皂苷C，并分别上Sephadex LH-20凝胶柱，除去杂质，收集洗脱液，得到质量百分比含量为98%的细梗香草皂苷B和质量百分比含量为95.6%的细梗香草皂苷C。

实施例2

1)将细梗香草药材加入体积百分比浓度为80%的乙醇浸泡后，加热回流提取3次，每次2小时，得到细梗香草提取液；

2)提取液浓缩离心，上清液加入大孔树脂柱，加入6倍柱体积蒸馏水洗脱除去糖类，再以体积百分比浓度为80%乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥后得细梗香草粗总皂苷；