[发明专利]检测口含型烟草制品中烟草特有亚硝胺释放情况的方法

说明书

技术领域

本发明涉及烟草领域，具体讲是涉及一种检测口含型烟草制品烟草特有亚硝胺（tobacco-specific N-nitrosamines，TSNAs）释放情况的方法，通过该方法可以为研究或衡量口含型烟草制品的安全性和进行品质调控提供具体的数据支撑。

背景技术

袋装口含型烟草制品是将烟叶粉碎后，将不同颗粒度的烟粉经过水蒸汽热处理等工艺加工后包装制成的烟草制品。该类制品与卷烟的最大区别是：属于无烟气烟草制品，使用时是将其放在口腔上唇侧部与牙龈之间，烟草成分经唾液溶解后通过口腔粘膜吸收。

近年来，由于各国政府对公共场所吸烟行为的限制，使得口含型烟草制品的消费量呈逐年增加的趋势。在美国，口含型烟草制品的销量已经连续5年（2001-2006年）以6%的速度持续增长，2007年增速达到7.1%。据统计，2006年度，美国的口含型烟草制品销售量已超过40亿美元[Tobacco Control 2008, 17, (5), 332-338]。而该类产品的质量检测与控制却缺少相关技术方法。

烟草特有亚硝胺（TSNAs）是烟草最主要的一类致癌物质[D. Hoffmann. Chemical Composition and Carcinogenicity of Smokeless Tobacco[J]. Adv Dent Res ,1997, 11:322-329]，包括N—亚硝基降烟碱（nnn），4－（n—甲基亚硝基）－（1－3—吡啶基）－1—丁酮（nnk）、n—亚硝基假木贼碱（nab）和n—亚硝基新烟草碱（nat）等4种。一些研究报道了不同类型品牌的无烟气烟草制品TSNAs的含量[Patricia Richter,  Knachelle Hodge,  Stephen Stanfill, et al. Surveillance of moist snuff: total nicotine, moisture, pH, un-ionized nicotine, and tobacco-specific nitrosamines[J]. Nicotine & Tobacco Research, 2008, 10 (11), 1645 – 1652]。然而，消费者从无烟气烟草制品中获得的TSNAs量除与该产品的TSNAs含量有关外，还可能与产品的pH、粒度、水分、小袋的材料以及消费者使用习惯等因素有关。无烟气烟草制品TSNAs的生物影响度的研究鲜见报道，消费者使用该烟草制品可获得的TSNAs量仍然不清楚，通过TSNAs释放实验将为相关品控及研发工作提供数据依据。

发明内容

本发明正是针对目前口含型烟草制品TSNAs释放检测方法的缺失，提出了一种检测口含型烟草制品TSNAs释放情况的方法，利用该方法能够模拟口含型烟草制品中的TSNAs在人体口腔的释放情况并对释放量和释放速率进行即时定量，可以检测不同品牌、规格、口味的各种口含型烟草制品的TSNAs释放速率以及释放程度，为研究和衡量口含型烟草制品安全性和进行品质调控提供技术支持。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明的检测口含型烟草制品中烟草特有亚硝胺释放情况的方法，通过模拟口含型烟草制品中的亚硝胺在人体口腔的释放情况并对释放量和释放速率进行即时定量，进而检测口含型烟草制品的亚硝胺体外释放速率以及释放程度，该方法包括以下步骤：

1)、体外亚硝胺释放与收集：创建模拟口含型烟草制品中的亚硝胺在人体口腔中释放情况的模型，该模型包括人工唾液、体外释放、收集装置，即：模拟人在使用口含烟时的情况，使人工唾液在恒温条件下持续不断的流过口含型烟草制品，实现口含型烟草制品的体外亚硝胺释放和收集过程；

2)、收集液及残留样品中亚硝胺含量定量分析：利用液相色谱-电喷雾串联质谱联用技术实现对收集液及残留样品中亚硝胺含量的定量分析；

3)、绘制体外亚硝胺释放曲线：由亚硝胺定量结果计算亚硝胺累积释放率，根据亚硝胺累积释放率，绘制亚硝胺释放曲线（利用Origin软件绘制）。