[发明专利]液相色谱高分辨质谱检测蔬菜样品中农药多残留量的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及液相色谱高分辨质谱检测蔬菜样品中农药多残留量的方法。

背景技术

近20年来，农药在农作物种植和生产中应用日益广泛，其在降低病虫害发生、促进生长、提高产量和改善产品品质方面的作用是十分显著的，已成为现代农业不可或缺的物质基础。但是，农药的使用无疑会导致作物体内药物的滞留或蓄积，并以残留的方式进入人体及生态系统。滥用或非法使用农药的现象仍然存在，其对人类及环境的危害主要是慢性、远期和累积性的，农产品中的农药残留已成为公认的农业和环境问题，对残留的监测与控制已经是目前国内外农药研究、开发、使用和管理的重要内容。

现在，蔬菜中农药残留量的检测主要有气相色谱法、液相色谱法、气相色谱-质谱法和液相色谱-串联质谱法。气相色谱法和液相色谱法主要是依赖色谱分离，针对复杂基质如韭菜、大蒜等样品时，在农药的定性上存在一定难度；气相色谱-质谱法和液相色谱-串联质谱法主要是利用低分辨质谱检测器，通过化合物结构断裂或重排产生的碎片进行样品检测，但是，在同时分析多个化合物时，由于受到扫描速度等的影响，灵敏度会受到较大影响，对色谱分离要求较高。然而，根据高分辨质谱检测器分析农药单同位素和重同位素的精确质量数及丰度，进而较易推测可靠的元素组成，提高了农药在定性与定量上的准确性和可靠性，避免了色谱法和四极杆低分辨质谱对色谱分离要求高的难题。

由于农药残留在蔬菜中含量极低，上述几种方法在检测时提高信噪比的方法一般有两种途径，一是从样品制备环节着手，利用各种方法尽可能的去除杂质和非目标化合物，最大倍数的浓缩样品，减少干扰，以达到研究的目的，这种方法在实际操作中难度非常大；另一种途径是根据目标化合物的特性，选用特异性检测器，尽可能减少背景干扰。而实际样品由于地域条件、蔬菜本身基质的差异，在测定时，受到非目标化合物干扰，给定性和定量带来很大的影响。

目前国内对通过提取农药的精确质量数来避开干扰影响的研究较少，已经制定的农产品中农药多残留量检测标准大多集中在气相色谱和液相色谱-串联质谱上，对使用高分辨质谱提取农药的精确质量数来检测农药残留、在降低对定性和定量干扰难题方面还没有在检测行业引起关注，仅在石化行业有专利采用气相色谱-高分辨飞行时间质谱检测原油中咔唑类化合物。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种快速、简便、灵敏度高，且有效减少或消除来自蔬菜的复杂基质干扰农药多残留量的液相色谱高分辨质谱检测方法的技术方案。

所述的液相色谱高分辨质谱检测蔬菜样品中农药多残留量的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）样品中农药残留的乙腈提取

称取25～50g蔬菜样品，加入25～50ml乙腈，进行高速分散处理，得到由蔬菜基质、水和乙腈组成的混合匀浆溶液，在上述匀浆溶液中加入15～25g复合盐盐析试剂，再进行高速分散处理，然后进行离心操作，静置分层；

2）样品提取溶液的分散固相萃取净化

取2～6ml上层乙腈，分别加入0.6～1.8g无水硫酸镁、0.05～0.2g N-丙基-乙二胺（PSA）和0.05～0.2gC₁₈，再进行振荡离心取上清液，上清液过0.22μm有机滤膜，即得到样品溶液；

3）使用液相色谱-高分辨质谱仪检测

a）标准溶液的制备：分别准确称取标准品农药，用体积比为3:7的丙酮-甲苯溶液溶解，分别配成1.0mg/mL的标准储备溶液，使用时根据各农药的响应，用乙腈稀释成标准工作液；

b）使用液相色谱-高分辨质谱仪器检测标准工作液和经净化后的样品溶液：由自动进样器分别吸取标准工作液和样品溶液，注入液相色谱-高分辨质谱仪器中，样品溶液中农药残留经液相色谱柱分离，高分辨质谱全扫描检测；

4）结果分析

数据库的构建：用ToxID软件建立步骤3）中标准品农药的化合物分子式数据库信息表；

定性和定量：以化合物的准分子离子峰的精确质量数为定性离子和定量离子；以标准工作液的质量浓度X为横坐标，定量离子的峰面积Y为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行外标法定量；用样品溶液中出现的色谱峰保留时间和定性离子(精确质量数)进行定性。

所述的液相色谱高分辨质谱检测蔬菜样品中农药多残留量的方法，其特征在于所述的步骤1）中复合盐盐析试剂为无水硫酸镁和氯化钠混合试剂，无水硫酸镁和氯化钠混合试剂中无水硫酸镁和氯化钠质量比10:1。