[发明专利]靶向载药超声微泡及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向载药超声微泡，其特征在于，包括脂质双分子层外壳、固定在所述脂质双分子层外壳外侧的靶向多肽、包裹在所述脂质双分子层外壳内部的生物惰性气体、以及分散于所述脂质双分子层外壳中的药物颗粒，所述靶向多肽为包含氨基酸序列CGNKRTRGC的多肽或蛋白衍生物。

2.如权利要求1所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，所述脂质双分子层外壳包括如下质量份数的各组分：

1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱                          7份，

1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱-聚乙烯二醇2000           0.5份，

1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱-聚乙烯二醇2000-生物素    0.5份；

所述药物颗粒为紫杉醇，且所述1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱与所述紫杉醇的质量比为7～8∶2～3。

3.如权利要求2所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，还包括亲和素，所述靶向多肽连有生物素，所述靶向多肽通过生物素-亲和素-生物素桥与所述1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱-聚乙烯二醇2000-生物素连接。

4.如权利要求2所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，还包括链霉亲和素，所述靶向多肽连有生物素，所述靶向多肽通过生物素-链霉亲和素-生物素桥与所述1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱-聚乙烯二醇2000-生物素连接。

5.如权利要求1或2所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，所述靶向载药超声微泡的粒径为0.5～8μm。

6.如权利要求1或2所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，所述生物惰性气体为全氟丙烷、全氟丁烷和六氟化硫中的至少一种。

7.如权利要求1所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，所述脂质双分子层外壳为磷脂或磷脂类衍生物。

8.如权利要求7所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，所述磷脂或磷脂类衍生物为1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酸甘油基-钠盐、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酸-钠盐和1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱中的至少一种。

9.如权利要求1所述的靶向载药超声微泡，其特征在于，所述药物颗粒为多烯紫杉醇、阿霉素、喜树碱、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、消炎痛、普洛比普洛芬、酮基布洛芬、炎痛喜康及双氯酚酸中的至少一种，或者所述药物颗粒为用于治疗乳腺癌的活性蛋白、多肽、疫苗或基因。

10.一种如权利要求3所述的靶向载药超声微泡的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：按质量份数配比紫杉醇7/4～3份、1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱7份，1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱-聚乙烯二醇2000 0.5份，1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰胆碱-聚乙烯二醇2000-生物素0.5份，溶于溶剂中制备药物磷脂混悬液；

步骤二：将所述药物磷脂混悬液混匀，在干燥的N2流作用下除去溶剂使磷脂在容器壁上形成一层均匀的薄膜，真空干燥1～3小时；

步骤三：在含有干燥磷脂薄膜的容器中加入经脱气处理的pH＝7.4的Tris缓冲溶液，得制备载药磷脂溶液，所述Tris缓冲溶液中包括10％体积的甘油和10％体积的丙二醇；

步骤四：加热所述载药磷脂溶液到相转变温度以上，水浴超声震荡使磷脂溶液分散彻底直至透明；

步骤五：将透明的载药磷脂溶液分装置西林瓶中，并将西林瓶中的空气置换成生物惰性气体，震荡30～60秒制备载药超声微泡；

步骤六：离心漂浮法清洗载药超声微泡3～4次，以除去未形成微泡的磷脂；

步骤七：在清洗过的载药超声微泡中加入亲和素，轻轻摇动室温下孵育15分钟后用离心漂浮法清洗3-4次，除去未耦合的亲和素；

步骤八：向步骤七得到的载药超声微泡中加入生物素化的靶向多肽，轻轻摇动并室温下孵育10分钟以上，用离心漂浮法清洗3～4次除去未结合的生物素化的靶向多肽，得到所述靶向载药超声微泡。

11.如权利要求10所述的靶向载药微泡的制备方法，其特征在于，所述步骤四中，震荡频率为4000～5000次/分钟，震荡幅度为10～40毫米，震荡时间为30～90秒。