[发明专利]通过基于改变LIPH功能的分子方法获得雷克斯动物

说明书

技术领域

本发明涉及鉴别并获得仅具有雷克斯(rex)表型皮毛的动物。本发明涉及毛皮动物领域，优选地，本发明涉及具有主要由绒毛组成或仅由绒毛组成的皮毛的动物的鉴别方法。本发明包括基于与毛囊正常功能改变有关的基因突变的分子方法的用途，这种改变干扰毛发生长过程。所述改变被认为有利于兔产业。

背景技术

和人类不同，大多数毛皮动物例如兔在其与特定天生功能有关的皮毛中具有三种不同类型的毛发。由“中心初级毛囊”产生的最长类型形成外面的毛皮，称为“针毛(guard hair)”，由“侧面初级毛囊”产生的中间层称为“芒发(awn hair)”，以及由“次级毛囊”产生的最短“绒毛(down hair)”也称为短毛，其具有非常薄的毛杆。毛囊在由“三组”形成的多组中组织化，其在三组内由中心初级毛囊和具有次级毛囊的两种侧面初级飞羽组成。

从1929年起为人所知的家兔(Oryctolagus cuniculus)中的“雷克斯(rex)”表型指的是基本上具有触感惊人的柔软的绒毛(即次级毛囊毛发)的动物。从那以后，表型也在许多其他毛皮动物中发现，例如小鼠(Mus musculus)、褐鼠(Rattus norvegicus)、家猫(Felis catus)、金仓鼠(Mesocricetus auratus)、土拨鼠(Cavia porcellus)。即使已经在不同基因中鉴定了许多突变，该表型的遗传基础是多种多样的而且了解甚少。

在兔中，皮毛的雷克斯表型的特征在于：

1)显著减少的针毛量和增加的绒毛量，这可以导致针毛完全缺失的极端表型(针毛定义为纤维直径大于30μm且长度最短30mm的纤维)。

2)当剩余针毛存在时它的极大缩短和绒毛的少量缩短，这是由剩余针毛和绒毛两者的长度的轻微差异或无差异引起的，和

3)胡须的卷曲。

这三个标准都用来评估和分类具有或不具有雷克斯皮毛表型的兔。雷克斯皮毛表型的毛皮质量赋予这些动物经济优势并经由专业饲养员挑选。

发明内容

本发明涉及鉴别具有至少95％绒毛的毛皮动物的方法，其中所述方法包括步骤(i)：检测由所述毛皮动物获得的生物样品中脂肪酶H(LIPH)基因突变的存在。

在另一个具体的实施方式中，本发明方法在步骤(i)之前还包括步骤(i’)：转化所述动物的细胞，用于显示LIPH基因的突变。

本发明还涉及鉴别具有至少98％绒毛的毛皮动物的方法，其中所述方法包括检测由所述毛皮动物获得的生物样品中LIPH基因的表达水平的步骤。

本发明还涉及根据本发明和包括步骤(i’)的方法获得的非人类转基因毛皮动物。

本发明进一步涉及特异性抑制LIPH基因表达的化合物用于获得具有至少95％的绒毛的毛皮动物的用途。

附图说明

图1：外显子9中的雷克斯1362delA突变的侧翼序列。和“野生型”(非雷克斯)基因型相比，观察到雷克斯个体的两个等位基因(纯合动物)中的腺嘌呤的缺失。杂合状态显示雷克斯和“野生型”等位基因两者有重叠。

图2：根据回交模型的兔参考家族的结构。“RR”和“Rr”分别指野生型，“rr”指雷克斯型。

图3：雷克斯性状(INRAR)的精细定位。

图4：以下兔种群中的qPCR：雷克斯表型、杂合体和普通型。

具体实施方式

本发明人已确定，在LIPH基因的外显子9中显示移码突变的兔具有绒毛比例增加的雷克斯表型皮毛。

本发明人已显示，突变的LIPH蛋白的表达导致雷克斯表型。因此本发明提供用于鉴别具有至少95％绒毛的毛皮动物的方法，其中所述方法包括步骤(i)：检测由所述毛皮动物获得的生物样品中脂肪酶H(LIPH)基因突变的存在。

在本发明的一种实施方式中，该方法还包括检测由所述毛皮动物获得的生物样品中LIPH基因的表达水平的步骤。

如本发明所使用的，术语“绒毛”指的是直径小于30μm，优选小于20μm，且长度最大为25mm，即短于25mm，优选短于20mm的纤维。

如本发明所使用的，术语“毛皮动物”指的是选自绵羊、山羊、欧洲盘羊、骆驼、羊驼和南美骆驼(美洲驼、原驼、小羊驼)、牛、马、海狸、狐狸、貂、麝鼠、海狸鼠、鼬鼠、臭猫和兔的哺乳动物。优选地，所述毛皮动物是兔，最优选地，所述毛皮动物是家兔(Oryctolagus cuniculus)。

优选地，所述毛皮动物具有至少95％的绒毛，更优选至少98％的绒毛，进一步优选100％的绒毛。