[发明专利]一种猪血浆抗氧化肽

说明书

技术领域

本发明属于食品加工领域，涉及一种猪血浆抗氧化肽。

背景技术

现代肉类工业屠宰过程中产生的动物血液是一种珍贵的蛋白质资源。它可以广泛的用在食品、饲料、实验室、制药、工业以及肥料等领域(Ockerman & Hanson，2000)。但是，只有一小部血液用于这些方面，大量的废弃血液被排放到环境中，引起严重的环境污染(Park & Hynn，2002)。在中国，每年产生约有150万吨猪血，其蛋白质含量相当于250万吨全蛋，但是真正利用起来的部分却很少(余奕珂等，2004)。因此，为了减少环境的污染和阻止宝贵蛋白质资源的流失，发展新的蛋白质资源利用的方法是非常有必要的。

近年来，自由基是现代食品工业以及加工食品的消费者很关心的一个问题。自由基调节脂肪的氧化。已经有研究证实，循环过程中膜蛋白和脂蛋白的氧化与关节炎、糖尿病和高血压、高血脂等疾病有很密切的关系(Halliwell，1994；Keaney，2000)。在过去的几年中，大量的研究开始集中于没有危害作用的、天然的抗氧化剂的开发和结构鉴定方面。这些抗氧化剂在对调节氧化反应的自由基清除的机理各不相同。他们可以作为脂质氧化的抑制剂，自由基清除剂以及催化自由基产生的金属离子的螯合剂(Vaya & Aviram，2001)。这些天然的抗氧化剂很多来源于植物。也有几个肽段序列来自于分离的动物蛋白中，如胶原蛋白、鸡蛋黄、乳清蛋白、酪蛋白、阿拉斯加鱼骨蛋白等中，研究也已经证明他们具有抗氧化作用(Je et al，2005；et al，2004；Rajapakse et al，2005；Wu et al，2003)。

研究认为，血浆白蛋白是血液循环中主要的抗氧化剂(Halliwell，1988；Peter，1996)。Bishop(1985)报道说血清白蛋白可以保护培养的细胞使其免受氧自由基的伤害。Bourdon，Loreau和Blache(1999)的体外研究则表明，白蛋白具有保护人的低密度脂蛋白(LDL)使其免受氧化和防止红细胞的溶血作用。另有研究利用动物血液蛋白生产功能性肽，包括TCA沉淀法得到的ACE抑制肽(Park et al，1996)，胃蛋白酶水解的ACE活性肽(Suetsuna，1995；Hynn & Shin2000)，牛血浆蛋白中的免疫活性肽(Park & Hyun，2002)，牛血清白蛋白中分离的血管舒缓肽以及牛血红素分离得到的opioid肽(Chiba & Yoshikawa，1991；Zhao et al，1994)。Faraii和Decker(1991)的研究表明猪血浆能抑制铁离子催化的脂质氧化。

但是迄今为止，尚没有报道对猪血浆分离白蛋白和球蛋白进行酶解生产肽及其抗氧化作用的研究。本身具有很好抗氧化作用的血浆蛋白酶解后到底发生了怎样的变化？本发明对这一问题进行了研究，期望为抗氧化肽的生产找到新的原料和方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种猪血浆抗氧化肽。

本发明的目的通过如下方案实现：

一种猪血浆抗氧化肽，它是通过如下方法制得的：

(1)猪血浆白蛋白水解物的制备：用碱性蛋白酶酶解浓度为40mg/mL的猪血浆白蛋白溶液，反应条件为pH 8.0～9.0，温度55～60℃，酶的添加量为0.8～1.0mg/mL蛋白溶液，取水解8～12小时的样品，90℃加热10min使酶灭活后，离心，取上清液；

(2)猪血浆蛋白抗氧化肽段的膜分离：将步骤(1)所得上清液通过分子量为3kDa的平板膜，过滤过程中用高纯氮加压，压力为0.03-0.04MPa，并用磁力搅拌器连续低速搅拌，分离得到分子量小于3kDa的肽段即为所述的猪血浆抗氧化肽A5。

其中，步骤(1)所述的反应条件优选pH 8.0，温度55℃；所述的酶的添加量优选0.8mg/mL蛋白溶液；水解时间优选12h。

所述的猪血浆白蛋白优选利用Heide K，Haupt H，Schwick HG.1984.Plasma proteinfractionation.In：Putnam FW，editors.The Plasma Proteins.New York：Academic Press.p545-597.中记载的冷乙醇沉淀法分离，具体工艺路线见图1。

一种猪血浆抗氧化肽的制备方法，包括如下步骤：