[发明专利]调控血管内皮细胞中血管细胞粘附分子-1表达的方法

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤学领域。更具体地，本发明涉及一种通过血管生成素样蛋白4(ANGPTL4蛋白)调控血管内皮细胞中血管细胞粘附分子-1表达的方法。

背景技术

ANGPTL4基因(最初该基因被发明人的实验室命名为pp1158)[朱洪新等，中华肿瘤杂志(2002)24(2)：123-125]就是利用此功能筛选技术平台从人胎盘cDNA文库中克隆到的新基因，该基因cDNA全长为1943bp，开放阅读框含1218bp，编码406个氨基酸，预计分子量为45.2kDa。N端有一疏水信号肽和卷曲(Coiled-Coil)结构域，C端有一纤维蛋白原样(Fibrinogen-like)结构域。并于2000年首先将该基因(原基因名为pp1158)的cDNA序列在GenBank上登录(登录号为AF202636)。现已同Yoon等克隆的PGAR[Mol.Cell.Biol.，Jul 2000；20：5343-5349]和Kim等克隆的HFARP[Biochem.J，2000，346：603-610]由HUGO统一正式命名为ANGPTL4(angiopoietin-like 4)。

ANGPTL4在肿瘤转移中的作用越来越引起人们的关注。目前的研究表明ANGPTL4对肿瘤转移的影响是非常复杂的，在不同的肿瘤中有不同的作用：对Lewis肺癌细胞和黑色素瘤细胞B16F0的研究表明ANGPTL4能够通过对血管和肿瘤细胞的双重影响，即改变血管的渗透及肿瘤细胞的运动和侵润能力，来抑制肿瘤细胞的转移。与此相反，在乳腺癌的最新研究表明，TGFβ1在乳腺癌中诱导ANGPTL4的上调，乳腺癌细胞分泌的ANGPTL4能够破坏内皮细胞之间的连接，增加肺毛细管的渗透性，促进肿瘤细胞的跨血管内皮细胞的迁移，与TGFβ1共同启动了乳腺癌的肺转移。

VCAM-1在内皮细胞上表达，通过与整合素α4β1介导细胞黏附。整合素α4β1/VCAM-1通路能够介导多种粘附反应，例如介导淋巴瘤细胞粘附到肝窦内皮细胞，在肝转移过程中起到非常重要的作用；整合素α4β1可以促进肿瘤细胞和HUVEC之间的粘附。然而，迄今为止，对于如何调控血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的表达或活性，本领域知之甚少。

因此，本领域迫切需要开发参与血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达或活性调节的物质。

发明内容

本发明的目的就是提供一种参与血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达调节的物质。

在本发明的第一方面，提供了一种血管生成素样蛋白4(ANGPTL4蛋白)或其激动剂的用途，它们被用于制备促进血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达的组合物或促进VCAM-1表达的促进剂。

在另一优选例中，所述的ANGPTL4蛋白是人ANGPTL4。

在另一优选例中，所述的ANGPTL4蛋白是重组蛋白。

在本发明的第二方面，提供了一种血管生成素样蛋白4拮抗剂的用途，它被用于制备抑制血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)表达的组合物。

在另一优选例中，所述的ANGPTL4拮抗剂包括针对ANGPTL4的siRNA、反义RNA、抗体、或其组合。

在另一优选例中，所述拮抗剂是单克隆抗体。

在本发明的第三方面，提供了一种体外(非治疗性)促进血管内皮细胞表达血管细胞粘附分子-1的方法，包括步骤：

向血管内皮细胞的培养体系中，添加血管生成素样蛋白4(ANGPTL4蛋白)或其激动剂。

在另一优选例中，所述的血管内皮细胞是人的血管内皮细胞。

在本发明的第四方面，提供了一种体外(非治疗性)抑制血管内皮细胞表达血管细胞粘附分子-1的方法，包括步骤：

向血管内皮细胞的培养体系中，添加血管生成素样蛋白4的拮抗剂。

在另一优选例中，所述的ANGPTL4拮抗剂包括针对ANGPTL4的siRNA、反义RNA、抗体、或其组合。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了分泌性ANGPTL4蛋白上调HUVEC细胞中VCAM-1的表达。各图如下：

a.蛋白印迹检测COS7-lenti-ANGPTL4和COS7-lenti-control细胞裂解液中和条件性培养上清中ANGPTL4的表达。