[发明专利]一种检测乳腺癌淋巴结转移特征蛋白的质谱试剂

权利要求书

1.一种用液相色谱质谱联用仪的方法检测人体血清样品中特异蛋白的试剂，其特征在于：特异蛋白是乳腺癌淋巴结转移的蛋白，含有能与特异蛋白质结合的磁珠基质，所述磁珠是可吸附样品中蛋白质的WCX阴离子基质磁珠或C8及C18疏水基质磁珠。

2.一种检测试剂盒，其特征在于：含有试剂盒操作方法的说明书；

含有阳性对照与阴性对照，所述对照可用液相色谱质谱联用仪进行分析；

将待检样品中相应蛋白质的质荷比及该蛋白的临界峰值均值K与所述选自51个特征蛋白中任意两个或两个以上蛋白逐一进行对比分析，所述特征蛋白质荷比m/z和临界峰值均值K分别为m/z＝5643，K≤5.84；m/z＝4651，K≤11.28；m/z＝2377，K＞6.19；m/z＝2240，K＞9.35；质荷比m/z误差＜0.001％，临界峰值均值K的变异系数CV＜5～10％。

3.人体血清样品中特异蛋白的试剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)4℃条件下2小时内收集乳腺癌无淋巴结转移和乳腺癌有淋巴结转移患者的两组血清样品，在-80℃低温冷冻备用；

2)采用WCX阴离子基质磁珠或C8及C18疏水基质磁珠对所述两组血清样品的蛋白进行吸附；

3)用液相色谱质谱联用仪对结合在表面的WCX阴离子基质磁珠或C8及C18疏水基质磁珠上的两组血清蛋白进行读取，由此获得两组蛋白质谱图谱；

4)在每次实验数据收集前，用标准蛋白及质谱的标准化质控O型血清样品校正仪器，使质荷比m/z误差＜0.001％和临界峰值均值K的变异系数CV＜5～10％，并精确地、定量地收集乳腺癌无淋巴结转移和乳腺癌有淋巴结转移患者优化的血清质谱图谱数据；

5)对所得数据进行统计学处理，根据乳腺癌无淋巴结转移和乳腺癌有淋巴结转移患者两组血清样品之间蛋白峰的差异，检测出两组血清蛋白质谱图谱之间有51个稳定的差异蛋白及其临界峰值；

6)将待检样品中相应蛋白质的质荷比及该蛋白的临界峰值均值K与所述选自51个特征蛋白中任意两个或两个以上蛋白逐一进行对比分析，所述特征蛋白质荷比m/z和临界峰值均值K分别为m/z＝5643，K≤5.84；m/z＝4651，K≤11.28；m/z＝2377，K＞6.19；m/z＝2240，K＞9.35；质荷比m/z误差＜0.001％，临界峰值均值K的变异系数CV＜5～10％。

4.权利要求3所述的人体血清样品中特异蛋白的试剂的制备方法，其特征在于：将待检样品中相应蛋白质的质荷比及该蛋白的临界峰值均值K与所述选自51个特征蛋白中任意两个或两个以上蛋白逐一进行对比分析。

5.权利要求4所述的人体血清样品中特异蛋白的试剂的制备方法，其特征在于：所述待检样品中相应蛋白是质荷比为5643、4651、2377、2240的特征蛋白。