[发明专利]补骨脂二氢黄酮甲醚抗哮喘病的应用

权利要求书

1.本发明公开了补骨脂二氢黄酮甲醚(29#)能够抑制IL-4分泌、具有抗哮喘作用，涉及哮喘、牛皮癣等自身免疫性疾病相关的化学药物和抗炎药物的应用。29#其化学结构式和物理常数见表1：

表1

本发明在体外通过IL-4-GFP转基因报告小鼠高通量筛选模型，采用IL-4-GFP转基因报告小鼠全脾脏细胞，在ConA、IL-2、IL-4因子的刺激下，与梯度稀释的不同浓度的29#共培养48小时，后收细胞，用anti-CD4-APC对培养的细胞分别进行染色，最后进行流式分析29#对IL-4-GFP⁺量的影响。本发明不仅在细胞水平证明了29#对IL-4的产生具有显著的抑制效果，同时通过构建小鼠哮喘模型，在体内证实了29#化合物具有很好的抗哮喘抗炎作用。

2.根据权利要求1所述的培养体系，其特征在于它是采用96孔培养板，200μl体系，在条件为37℃、CO₂浓度为5％、湿润的培养箱中进行培养。

3.根据权利要求1所述的共培养，其特征在于它是采用每孔中加入100μl梯度稀释后不同浓度的29#和100μl的浓度为4*10⁶个/ml细胞悬液共培养。

4.根据权利要求1所述的刺激因子ConA、IL-2、IL-4，其特征在于它的终浓度分别为2.5μg/ml、2ng/ml、20ng/ml。

5.根据权利要求1所述的anti-CD4-APC抗体染色，其特征在于它是在冰浴避光染色15至30分钟。

6.根据权利要求1所述的抗哮喘模型，其特征在于它是对小鼠腹腔注射用氢氧化铝乳化鸡清白蛋白(OVA)而诱导的哮喘模型。