[发明专利]适用于酶抑制法农药残留检测的样品前处理方法及农药检测方法和检测盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种适用于酶抑制法农药残留检测的样品前处理方法及相应的农药残留快速检测方法和根据该方法制备的快速检测盒。

背景技术

农药对确保农业丰产丰收做出了巨大贡献，但是残存于环境，特别是食品中的农药及其降解产物也给人类带来了潜在危害，其引起的食品安全性问题受到了人们的广泛关注。为保证人类健康，需要对农产品，特别是粮食进行农药残留检测，确保食品中的农药残留量在安全范围内。

目前，农药残留的检测方法主要有：薄层色谱法、气相色谱法、分光光度法等，而前两种检测精度高，能实现每种农药的定量检测，但由于操作繁杂，仪器昂贵，且需要专人操作，难以满足快速、简便的市场需求。因此食品中的农药残留快速检测技术面临新的挑战和发展机遇。

我国农药残留快速检测技术应用最多的是酶抑制法，其具有较高的专一性、准确性及低成本等优点。目前，主要被应用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速测定。该方法的原理是：有机磷类和氨基甲酯类农药可以抑制胆碱酯酶活性，进而影响胆碱酯酶与底物的显色反应。因此，简单通过显色反应的颜色，根据反应颜色的深浅即可判断样品中的农药残留情况。根据这一原理，开发出了多种农药残留速测卡。常见的农药残留速测卡一般采用胆碱酯酶（白色）与底物靛酚乙酸酯（红色底物）反应，水解生成乙酸和蓝色的靛酚。

国家标准GB/T5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测，该标准中涉及两种酶抑制法：其中纸片法主要由酶片和底物片两部分组成，对样品进行简单的前处理后，以少量缓冲液提取样品中的农药残留，取50～100微升提取液滴到酶片上，配以简易的恒温装置，经过抑制反应和显色反应后即可判定结果。酶抑制率法是根据待测样品提取液对胆碱酯酶的抑制率来确定待测样品中是否含有有机磷或甲酸酯类农药。然而，小麦、稻谷等粮食样品中对农药的限量比蔬菜等样品食品要低得多，如果单凭现在的酶抑制法来检测粮食样品，其灵敏度无法达到相关要求。

CN101776601A公开了有机磷农药的荧光检测方法，利用带程序的荧光分光光度计，以卟啉化合物为荧光指示剂和显色剂，经制备卟啉溶液和有机磷农药溶液及液态检测溶液，测量液态卟啉检测溶液中有机磷农药。虽然灵敏度高，但是样品处理时需要用到较多的有机溶剂，如乙腈，容易造成污染，且操作也比较复杂；此外，需要配备荧光分光光度计，成本相对较高。

CN1763508A公开了一种快速检测农药残留的方法，通过(1)提取被检测物， (2)还原、产气反应：将被检测物置于装有固体还原剂的反应器中，被检测物中的二硫代氨基甲酸 酯迅速还原为二硫化碳。此时，从加液器中加入酸溶液，瞬间产生大量气体。(3)显色反应：将二硫化碳随着大量气体引入吸收器中并被吸收器中的吸收液所吸收。二硫化碳与吸收液中的特定显色剂反应，溶液变成黄色。(4)定性分析：颜色深浅与样品中的二硫代氨 基甲酸酯类农药含量成正比，从而使样品中的二硫代氨基甲酸酯类农药得到测定。该方法灵敏度无法到达粮食样品的要求，且样品前处理时比较麻烦，需要配备反应器才能进行。

CN1266990A公开了一种有机磷农药残留速测试剂：检测液A为带色的金属盐溶液，如高锰酸钾溶液或重铬酸钾溶液等；检测液Ｂ为有强催化作用的金属离子酸溶液（Cu、Pd、Au、Ag等），如Pd离子硫酸溶液。有机磷农药在检测液B催化作用下水解为磷酸和醇，其水解物与检测液A反应可使检测液A的颜色褪去。这样，利用检测液Ａ褪色与否即可来判断蔬菜中是否有超量有机磷农药残留。该试剂虽然操作较为快速，但灵敏度低，根本无法满足粮食农药残留检测的需要。

可见，现有的农药残留方法，要么灵敏度不够高，要么操作复杂，成本高。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种适用于酶抑制法农药残留检测的样品前处理方法。

本发明的另一个目的在于提供一种农药残留快速检测方法。

本发明的再一个目的在于提供一种农药残留快速检测盒。

适用于酶抑制法农药残留检测的样品前处理方法，包括以下步骤：

1)    将待测样品粉碎，加入提取液，震荡，使样品中的农药残留转移至提取液中；

2)    在提取液中加入农药残留增强剂，反应。

一种农药残留快速检测方法，包括以下步骤：

1)    将待测样品粉碎，加入提取液，震荡，使样品中的农药残留转移至提取液中；

2)    在提取液中加入农药残留增强剂，反应得到反应液；