[发明专利]甘蒙锦鸡儿提取物的提取方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及藏药甘蒙锦鸡儿的新用途。

背景技术

甘蒙锦鸡儿(Caragana opulens)系豆科锦鸡儿属灌木，广泛产于内蒙古、河北、山西、陕西、宁夏、甘肃等地(中国科学院中国植物志编辑委员会主编.中国植物志.42卷.第一分册。北京：科学出版社，1993年59页)，是藏药查玛的原植物之一，性凉、味苦，可清各种肌肉热和脉热，能排脉病并有催吐作用，其茎枝皮可祛风活血，止痛利尿，补气益肾(中国科学院西北高原生物研究所编著.藏药志.西宁：青海人民出版社，1991年，237-238页)。但到目前为止，还未见对甘蒙锦鸡儿现代药理研究的报道。

发明内容

本发明的目的是提供甘蒙锦鸡儿的α-葡萄糖糖苷酶抑制活性的新用途。

本发明是甘蒙锦鸡儿提取物的提取方法，其步骤为：

(1)将甘蒙锦鸡儿树皮进行粉碎，干燥处理；

(2)将粉碎物料放置在大极性有机溶剂中浸润提取2-3次，每次浸润5-10；

(3)将提取液进行过滤、减压浓缩得醇提浸膏，浸膏用40-70℃热水溶解得水悬浮液，水悬浮液用等体积量小极性有机溶剂萃取除去油脂性成分，最后用中极性有机溶剂萃取，得到甘蒙锦鸡儿提取物。

甘蒙锦鸡儿提取物的用途，是用作制备治疗糖尿病药物。

本发明首次发现甘蒙锦鸡儿的中极性有机溶剂提取物具有显著的α-葡萄糖糖苷酶抑制活性，具有良好的降低餐后血糖的作用，可作为有效成分制成一类新型的降低餐后血糖的药物。

具体实施方式

下面详细说明本发明：

本发明是甘蒙锦鸡儿提取物的提取方法，其步骤为：

(1)将甘蒙锦鸡儿树皮进行粉碎，干燥处理；

(2)将粉碎物料放置在大极性有机溶剂中浸润提取2-3次，每次浸润5-10；

(3)将提取液进行过滤、减压浓缩得醇提浸膏，浸膏用40-70℃热水溶解得水悬浮液，水悬浮液用等体积量小极性有机溶剂萃取除去油脂性成分，最后用中极性有机溶剂萃取，得到甘蒙锦鸡儿提取物。

小极性有机溶剂可以是石油醚、环己烷、正己烷、汽油中的一种或几种混合，除去油脂性成分的水悬浮液用等体积量中极性有机溶剂萃取得中极性有机溶剂提取物，其中的中极性有机溶剂可是乙酸乙酯、乙醚、氯仿、二氯甲烷中的一种或几种混合。

生物活性测试方法：

1.甘蒙锦鸡儿提取物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用

以淀粉为底物，测定甘蒙锦鸡儿提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，具体为：称取一定量甘蒙锦鸡儿提取物，用10％乙醇水溶液配置成浓度为100mg/ml的药物溶液，取此溶液20μl与2μlα-淀粉酶(0.4U/ml，Sigma公司)混合，37℃孵育15分钟，加入1％的淀粉溶液室温放置5分钟，用碘滴定显色法，在630nm波长下测定OD值，通过淀粉消耗量计算α-葡萄糖苷酶抑制率，阳性对照药为拜唐苹，设空白和阴性对照，抑制率＝((样品-阴性)/(空白-阴性))×100％。结果见实施例。

2.甘蒙锦鸡儿提取物对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠淀粉负荷糖耐量的影响

用小鼠整体动物模型，采用腹腔注射四氧嘧啶复制小鼠糖尿病模型，观察甘蒙锦鸡儿提取物对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠淀粉负荷糖耐量的影响。具体做法为：取体重20-30g昆明种小鼠，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶，72小时后测定血糖，选取血糖值大于13mM的小鼠，每组12只，雌雄各半分为5组，即糖尿病模型组、拜唐苹组、甘蒙锦鸡儿提取物的高、中、低剂量组，测定空腹血糖(0分钟)，给药10分钟后，各组均灌胃以淀粉5g/kg，模型组灌胃以生理盐水，分别于30，60，90，120分钟后取眶后静脉丛血，用葡萄糖氧化酶法在96孔板中测定血糖含量。结果见实施例。

生物活性实验表明，甘蒙锦鸡儿经大极性溶剂提取、小极性溶剂脱脂后，中极性溶剂萃取得到的中极性提取物具有显著的抑制α-葡萄糖苷酶活性，能明显抑制糖尿病小鼠的血糖升高。

具体实验示例

1：藏药甘蒙锦鸡儿提取物的制备

取藏药甘蒙锦鸡儿树皮10kg用95％乙醇浸泡3次，每次用95％乙醇30L，每次浸泡5-10天。浸泡液合并浓缩得浸膏(GJ-1)550g，浸膏用60℃热水溶解得悬浮液，悬浮液依次用石油醚、乙酸乙酯萃取3次，得石油醚提取物128g(GJ-2)、乙酸乙酯提取物132g(GJ-3)。

2：藏药甘蒙锦鸡儿提取物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用

测定方法见“发明内容”；结果如表1