[发明专利]甲醛生物降解剂及其制备方法有效
申请号: | 201110054640.7 | 申请日: | 2011-03-04 |
公开(公告)号: | CN102181385A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 曾润颖;陈兴麟;叶德赞 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第三海洋研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/02;B01D53/84;B01D53/72;A62D3/02;A23L1/015;C12R1/38;A62D101/28 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甲醛 生物降解 及其 制备 方法 | ||
1.一株假单胞菌IOFA1(Pseudomonas sp.IOFA1),所述假单胞菌IOFA1(Pseudomonas sp.IOFA1)已于2010年10月26日保藏在中国典型培养物保藏中心,该保藏中心保藏编号为CCTCC NO:M 2010280,该保藏中心的地址为中国.武汉.武汉大学。
2.甲醛生物降解剂,其特征在于所述甲醛生物降解剂为假单胞菌IOFA1菌体破碎液干粉。
3.如权利要求2所述的甲醛生物降解剂,其特征在于所述甲醛生物降解剂的主要成分为甲醛脱氢酶,按质量百分比,所述甲醛脱氢酶至少占90%,所述甲醛脱氢酶为一种甲醛降解酶,甲醛生物降解剂中还含有10%以下的杂蛋白。
4.如权利要求2所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)将假单胞菌IOFA1用培养基进行活化后,接种于培养基中,振荡培养;
2)在培养基中加入甲醛溶液继续振荡培养;
3)将步骤2)中所得的培养液在4℃温度下离心,去除上清液,收集菌体;
4)在菌体中加入100mL无菌水,悬浮起菌体,收集悬浮液;
5)将悬浮液中的菌体破碎后离心,去除沉淀,将上清液过滤除菌,并冷冻干燥,即得假单胞菌IOFA1菌体破碎液干粉,再经纯化,即得甲醛生物降解剂。
5.如权利要求4所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于在步骤1)中,所述培养基采用LB培养基。
6.如权利要求4所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于在步骤1)中,所述培养的条件为:在20~37℃的条件下振荡培养至OD600=0.8~1.5。
7.如权利要求5所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于所述LB培养基的配制方法为:称取10g氯化钠,10g蛋白胨和5g酵母膏,溶解于蒸馏水中,并用蒸馏水定容至1L,经121℃灭菌20min。
8.如权利要求4所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于在步骤2)中,所述在培养基中加入甲醛溶液至终浓度为100~200mg/mL;所述继续振荡培养的条件为:在20~37℃条件下振荡培养24~72h。
9.如权利要求4所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于在步骤4)中,所述无菌水是采用经4℃预冷的无菌水。
10.如权利要求4所述的甲醛生物降解剂的制备方法,其特征在于在步骤5)中,所述破碎采用匀浆机破碎,条件为:匀浆压力为700MPa,时间为5min;或采用超声波破碎,条件为:模式01,变幅杆03,工作时间10min,超声2.5s,间隙7.5s,功率30%,选用信仪-IID超声仪;所述过滤采用0.22μm的滤膜进行过滤;所述滤膜为亲水性滤膜,所述亲水性滤膜选自纤维素膜或聚醚砜膜。
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