[发明专利]一种星座美洲海鞘脂溶性提取物

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域星座美洲海鞘提取物的制备及其用途。

背景技术

星座美洲海鞘，也称星座褶胃海鞘、星座列精海鞘，拉丁名Amaroucium constellatum Verrill，国外也命名为Aplidium constellatum Verrill；为海鞘纲(Ascidiacea)、简鳃亚目(Aplousobranchia)、三段海鞘科(Polyclinidae)海鞘，是我国东南沿海常见海洋附着生物；实验表明，星座美洲海鞘提取物尤其是乙酸乙酯萃取部位对卤虫(Artemia salina)无节幼体显示了较强的细胞毒性，提示脂溶性部位可能具有一定的抗肿瘤活性；其结果见于以下文献：方玉春，宋瑾，朱天骄，等.青岛沿海海洋附着生物抗肿瘤活性的筛选[J].中国海洋药物，2004，23(2)：9-10。有关星座美洲海鞘脂溶性提取物在药物和功能食品中的应用目前尚无文献报道。

海洋动物脂溶性提取物的常规化学溶剂提取方法具体包括：冰冻个体解冻、切片粉碎，或冻干个体粉碎，然后用有机溶剂或/和水提取制备得到总提取物，所用的有机溶剂可采用醇类，如乙醇，甲醇；将总提取物溶于水或甲醇水溶液后，以较高沸点烷烃(石油醚、正己烷、环己烷)，或乙酸乙酯等酯类、氯仿或二氯甲烷等卤代烃类溶剂萃取，取溶剂萃取相，回收溶剂后干燥即得到脂溶性部位，其中所用的烷烃(或酯类、卤代烃类)溶剂优选采用环己烷或乙酸乙酯。脂溶性部位也可以直接通过上述烷烃、酯类或卤代烃类溶剂提取、或者二氧化碳(CO₂)超临界萃取获得。

海洋鱼油的常见工业制备方法有压榨法和溶剂提取法，压榨法一般包含高温蒸煮步骤，溶剂提取法温度也往往高于60℃；从而容易引起其中不稳定脂溶性成分变质。

发明内容

本发明目的在于提供一种星座美洲海鞘脂溶性提取物的快速低温制备方法及其用途。

本发明的技术方案采用星座美洲海鞘冰冻个体直接加乙酸乙酯形成低温混合物，粉碎匀浆，离心，取上层乙酸乙酯清液，回收溶剂后干燥，其特征是提取步骤如下：

A、称取星座美洲海鞘-18℃冰冻个体，按照每公斤海鞘加1L溶剂的比例，即直接加入1倍体积的乙酸乙酯形成低温混合物，再粉碎匀浆6min；

B、4℃低温离心6min，转速6500转/min；离心后倾倒收集上层乙酸乙酯清液；下层为水和肉糜混合物；

C、水和肉糜混合物再加1倍体积的乙酸乙酯重复2次步骤A、B中的匀浆、离心过程，收集每次的上层乙酸乙酯清液；

D、合并3次的上层乙酸乙酯清液，减压浓缩回收溶剂乙酸乙酯，干燥，得到粘稠油状物，即星座美洲海鞘脂溶性提取物。星座美洲海鞘脂溶性提取物中多不饱和脂肪酸类化合物的相对含量采用气相色谱-质谱法GC-MS进行分析，测定时，将星座美洲海鞘脂溶性提取物样品按照GB/T17376-1998动植物油脂标准进行脂肪酸甲酯制备，再按照GB/T17376-1998动植物油脂标准进行脂肪酸甲酯的气相色谱分析；各脂肪酸组分的相对含量以面积归一法计算得出。

本发明的突出特点是为星座美洲海鞘提供了新的快速低温制备方法，其脂溶性部位制备工艺简单，具有提取温度低、操作时间短的优点，可有效降低制备过程中星座美洲海鞘脂溶性成分中的ω-3类多不饱和脂肪酸、类胡萝卜素等氧化变质的危险。星座美洲海鞘的原料来源丰富、价廉，制备的提取物以ω-3类多不饱和脂肪酸类化合物EPA+DHA作为质量控制的气相色谱-质谱法(GC-MS)指标成分，相对含量大于等于30％；涉及血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平的降低，具有良好的防治血脂升高的作用，有很好的开发和食用、药用前景，可用于制备防治血脂升高的药物或功能性食品。

具体实施方式

实施例1

星座美洲海鞘-18℃冰冻个体每次取2.0kg，直接加2L乙酸乙酯，在粉碎匀浆6min，4℃低温离心，转速6500转/min；收集上层乙酸乙酯清液；下层水分和肉糜混合物再加2.0L乙酸乙酯快速重复2次匀浆、离心过程；合并3次的上层乙酸乙酯清液，回收溶剂后干燥，得到黄褐色粘稠油状物，即星座美洲海鞘脂溶性提取物。重复多次提取，产品在24.8-31.2克之间，其提取率为1.24-1.56％。